[发明专利]一种岩生报春组织培养与快速繁殖方法有效
| 申请号: | 201010506859.1 | 申请日: | 2010-10-14 |
| 公开(公告)号: | CN101965796A | 公开(公告)日: | 2011-02-09 |
| 发明(设计)人: | 张启翔;赵妍;潘会堂;程堂仁;王佳;董玲玲 | 申请(专利权)人: | 北京林业大学 |
| 主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王加岭;张庆敏 |
| 地址: | 100083 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 岩生报春 组织培养 快速 繁殖 方法 | ||
1.一种岩生报春的组织培养与快速繁殖方法,包括如下步骤:将种子表面消毒后进行接种,获得无菌苗后,接种腋芽进行丛生芽的诱导,将获得的不定芽进行生根培养和移栽,其中,所述的种子接种至1/2MS或MS培养基;所述的丛生芽诱导培养基为MS+2.5mg/l6-BA+1.0mg/l NAA,pH为5.9~6.0;所述的不定芽生根培养基为MS或MS+0.1~0.2mg/l NAA,pH 5.9~6.0。
2.根据权利要求1所述的组织培养与快速繁殖方法,其特征在于,还包括在所述丛生芽诱导后,将丛生芽的叶片或叶柄接种至愈伤组织诱导培养基上,诱导愈伤组织,并将愈伤组织接种至愈伤组织增殖培养基上进行增殖培养,将增殖后的愈伤组织接种到愈伤组织分化培养基上培养,分化出不定芽,其中,所述的无菌苗叶片和叶柄的愈伤组织诱导培养基为MS+1~2.5mg/l 6-BA+0.5~1.5mg/l NAA,pH5.8~5.9;所述的愈伤组织增殖培养基为MS+0.5mg/l TDZ+0.5~1.5mg/l 2,4-D,pH5.8~5.9;所述的愈伤组织分化培养基为MS+10mg/l6-BA+2mg/l NAA,pH 5.8~5.9。
3.根据权利要求1所述的组织培养与快速繁殖方法,其特征在于,所述的种子表面消毒包括:用清水浸泡种子24h,在超净工作台内先用75%乙醇消毒15~30s,无菌水冲洗5~6次,再用质量比为0.1%的升汞溶液消毒6~8min,无菌水洗涤5~6次。
4.根据权利要求3所述的组织培养与快速繁殖方法,其特征在于,所述的所述的种子表面消毒包括:用清水浸泡种子24h,在超净工作台内先用75%乙醇消毒15s,无菌水冲洗5次,再用质量比为0.1%的升汞溶液消毒6min,无菌水洗涤5次。
5.根据权利要求1或2所述的组织培养与快速繁殖方法,其特征在于,所述的种子接种培养、丛生芽诱导培养时,光照条件为自然散射光2500~3000Lux加人工辅助光1500~2000Lux,光照时间为12h/d;所述的愈伤组织诱导时,先暗培养20d,之后光照培养,其中光照培养的光照条件为,自然散射光2500~3000Lux加人工辅助光1500~2000Lux,光照时间为12h/d。
6.根据权利要求1所述的组织培养与快速繁殖方法,其特征在于,所述生根培养时,光照条件为自然散射光2500~3000Lux加人工辅助光2500~3000Lux。
7.根据权利要求2所述的组织培养与快速繁殖方法,其特征在于,所述的用于增殖培养的愈伤组织为诱导的初始黄绿色的愈伤组织。
8.根据权利要求2所述的组织培养与快速繁殖方法,其特征在于,所述的用于不定芽分化的愈伤组织为块状质地疏密适中的愈伤组织。
9.根据权利要求1所述的组织培养与快速繁殖方法,其特征在于,所述的移栽是在生根培养基中培养2~3周后,炼苗4~5天移栽至温室细草炭土中培养,移栽温度为18~25℃。
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