[发明专利]固定化漆酶的制备方法无效
申请号: | 201010505175.X | 申请日: | 2010-10-12 |
公开(公告)号: | CN101974507A | 公开(公告)日: | 2011-02-16 |
发明(设计)人: | 尉亚辉;马丁;程亚刚;郭斌 | 申请(专利权)人: | 尉亚辉;马丁;程亚刚;郭斌 |
主分类号: | C12N11/08 | 分类号: | C12N11/08 |
代理公司: | 中国科学院西安专利中心 61001 | 代理人: | 任越 |
地址: | 710069 陕西省西*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 固定 化漆酶 制备 方法 | ||
1.一种固定化漆酶的制备方法,采用有多孔烧结玻璃环,其特征在于,包括以下步骤:
步骤一、以CuBr2为催化剂,2,2’-联吡啶为配体,2-溴丙酸乙酯为自由引发剂,以多孔烧结玻璃环为载体,制备具有甲基丙烯酸缩水甘油酯接枝聚合功能的多孔烧结玻璃环;
步骤二、在漆酶溶液中,加入具有甲基丙烯酸缩水甘油酯接枝聚合功能的多孔烧结玻璃环,在30℃条件下震荡或搅拌16~24小时后,加入戊二醛溶液至最终的质量浓度为1%,室温下交联1小时,过滤后纯水洗涤,再离心去除表面水分,即得到吸附交联在多孔烧结玻璃环上的固定化漆酶。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述的具有甲基丙烯酸缩水甘油酯接枝聚合功能的多孔烧结玻璃环的制备具体包括:先取多孔烧结玻璃环加至二氯甲烷溶剂中,搅拌并真空脱气后,加入三乙胺和引发剂2-溴基异丁酰溴反应24小时,反应结束后离心分离出固体,用二氯甲烷、四氢呋喃和丙酮溶剂依次洗涤,并于常温下真空干燥,得键合有引发剂2-溴基异丁酰溴的多孔烧结玻璃环;再将该多孔烧结玻璃环加至环己酮溶剂中,搅拌并真空脱气后,加入甲基丙烯酸缩水甘油酯、2,2’-联吡啶、CuBr2、以及自由引发剂2-溴丙酸乙酯;然后,通入氮气驱除反应体系中的空气,于-5℃~5℃冰浴中抽真空后,升至室温再通入氮气,如此反复除去空气;最后,在氮气保护并搅拌下,30℃进行恒温接枝聚合反应,反应结束后,将反应体系冷却至常温,离心分离反应产物,即得具有甲基丙烯酸缩水甘油酯接枝聚合功能的多孔烧结玻璃环。
3.根据权利要求1所述的固定化漆酶制备方法,其特征在于,所述漆酶溶液的质量浓度为2~3%。
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