[发明专利]一种蝇蛆壳来源壳聚糖止血海绵及其制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明属于医用止血材料领域，涉及一种蝇蛆壳来源壳聚糖止血海绵及其制备方法，尤其是涉及一种能快速止血、止血机制多样、可用于术中植入性止血并可预防创面伤口感染、促进创面愈合的蝇蛆壳来源壳聚糖及其止血海绵和其制备方法。

背景技术

出血是引起各种创伤死亡的主要原因。快速止血是各种手术及创伤急救的重要环节。局部止血材料由于在对手术及突发性事故的急救治疗中有着简便、迅速等特点，是院前及术中急救止血的首选措施。对理想局部止血材料的研发一直是国内外关注的热点。

壳聚糖是一种自然界含量丰富的天然高分子线性多糖。早期大量研究已证明壳聚糖无毒性、无免疫原性，且具有良好的生物降解性、抗菌活性及促进创伤愈合等生物学优势。近年来研究发现壳聚糖还具备独特的止血活性。迄今为止，越来越多的研究开始关注这种生物学特性良好的新型止血材料。如美国HemCon Medical Technologies公司生产的HemCon止血绷带，已于2002年9月由美国FDA批准生产，用于中重度大出血救治。迄今美国FDA已批准数种壳聚糖类止血产品用于暂时性外用止血急救，国内目前类似产品较少。

现有研究表明，壳聚糖的各种生物学活性，包括止血活性与其提取制备工艺及原料来源密切相关。目前，壳聚糖的制备原料多采用天然收集的虾蟹壳经高浓度酸碱高温长时间提取制备，在原料的质量控制以及生产工艺的重现性方面存在较大隐患。此外，由于环境污染等造成的国内天然壳聚糖生产原料不足问题日益明显，开发新资源、降低生产成本也是目前的迫切任务。

发明内容

本发明提供了一种能快速止血、止血机制多样、可用于术中植入性止血并可预防创面伤口感染、促进创面愈合的壳聚糖止血海绵。

本发明所提供的壳聚糖止血海绵，是以蝇蛆壳为来源提取制备的。

所述蝇蛆壳的来源是广泛的，如一种人工繁殖的食草蝇的蝇蛆壳。

本发明的第二个目的是提供一种上述壳聚糖止血海绵的制备方法。

本发明所提供的制备方法，可包括以下步骤：

1)将清洁干燥后的蝇蛆壳粉碎，用盐酸溶液除金属离子，用氢氧化钠溶液脱蛋白质，用过氧化氢溶液脱色，用氢氧化钠溶液梯度脱乙酰化，干燥后成粉剂；

2)将步骤1)获得的壳聚糖粉剂溶解于稀乙酸溶液中，冷冻干燥，灭菌，得到蝇蛆壳来源壳聚糖止血海绵。

在上述蝇蛆壳来源壳聚糖止血海绵的制备方法中，所述步骤1)中盐酸溶液的浓度优选为0.5-10mol/L，氢氧化钠溶液的重量浓度优选为1-20％，过氧化氢溶液的重量浓度优选为1-20％，氢氧化钠溶液重量浓度梯度优选为30-60％；其中，脱乙酰化次数为2-6次，反应时间为4-18小时，温度40-90℃。

所述步骤2)中优选为按重量体积比浓度0.5-20％将壳聚糖粉剂溶解于0.5-10％的稀乙酸溶液中。

此外，步骤2)中将壳聚糖粉剂溶解于稀乙酸溶液后，可倒入模具中自流平并预冷，再将模具冷冻干燥，使模具中物质呈微多孔状结构的海绵体，孔腔隙直径优选为0.5-20μm。

将海绵体取出即为蝇蛆壳来源壳聚糖海绵；再经密封包装、灭菌得到蝇蛆壳来源壳聚糖止血海绵成品。

本发明的另一目的是提供以上所述蝇蛆壳来源壳聚糖海绵的新用途。该蝇蛆壳来源壳聚糖海绵可以在制备创伤性出血的外用急救止血材料和/或术中植入性止血材料中的应用；还可以在制备兼具止血、防创面伤口感染和促进创面愈合的功能材料中的应用。

本发明提供了一种蝇蛆壳来源壳聚糖止血海绵、其制备方法及应用。该蝇蛆壳来源壳聚糖止血海绵的止血机制和特点如下：

1)该止血海绵呈微多孔状结构，孔腔隙直径0.5-20μm，利于血细胞的吸附和聚集，是其物理机械性止血基础；

2)该止血海绵与抗凝全血共孵育两分钟即可大量吸附局部红细胞并引起红细胞形态学的显著变化，呈明显多角状或有伪足形成；

3)该止血海绵与富含血小板血浆共孵育两分钟即可引起局部血小板的明显激活；

4)该止血海绵可在不依赖红细胞及血小板存在的前提下明显促进局部凝血酶生成。

本发明蝇蛆壳来源壳聚糖止血海绵的生物学活性如下：

1)该止血海绵可抑制大肠杆菌及多种金黄色葡萄球菌的生长；

2)该止血海绵可促进成纤维细胞及原代肝细胞的增殖；

3)该止血海绵在体内可吸收降解，具备良好的血液、细胞以及组织相容性。