[发明专利]一种人少突神经胶质瘤标志物MAP2蛋白及其用途无效
| 申请号: | 201010290758.5 | 申请日: | 2010-09-21 |
| 公开(公告)号: | CN102408478A | 公开(公告)日: | 2012-04-11 |
| 发明(设计)人: | 施前;杨柳松;徐晓恩 | 申请(专利权)人: | 复旦大学 |
| 主分类号: | C07K14/47 | 分类号: | C07K14/47;G01N33/53;G01N27/62;G01N21/64 |
| 代理公司: | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 | 代理人: | 吴桂琴 |
| 地址: | 20043*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 人少突 神经 胶质 标志 map2 蛋白 及其 用途 | ||
1.一种人少突神经胶质瘤标志物MAP2蛋白,其特征在于,所述的MAP2蛋白其分子量为199526Da。
2.一种检测人少突神经胶质瘤标志物MAP2蛋白的方法,其特征在于,在完整离体的肿瘤组织中筛选差异蛋白,然后用抗体进行免疫印迹和免疫组化后续验证,获得差异蛋白MAP2蛋白。
3.按权利要求2所述的方法,其特征在于,其包括步骤:
1)制备少突神经胶质瘤冰冻标本和石蜡包埋标本,
分别将离体的肿瘤标本速冻并于-80℃保存,制备少突神经胶质瘤冰冻标本,组织学评估所述肿瘤组织中肿瘤细胞的含量超过80%;福尔马林固定和石蜡包埋制得少突神经胶质瘤石蜡包埋标本;
2)三色FISH技术分析检测染色体臂1p上等位基因的缺失
用1p36微缺失综合症的特异性三色荧光标记探针,检测染色体臂1p上等位基因的缺失;
3)基于iTRAQ-LC-MS/MS技术的蛋白质组分析蛋白质谱,寻找差异蛋白
直接采用离体的肿瘤组织获得高丰度的蛋白后,顺序进行蛋白纯化、消化裂解后,再用iTRAQ试剂进行差异标记及样品混合,离心干燥,色析分离,再经四级杆飞行时间串联质谱进行蛋白质组数据分析,确定1p缺失和非缺失的少突神经胶质瘤间的差异蛋白;
4)免疫印迹和免疫组化检测
用Western blot对挑选出的差异蛋白进行验证。
4.MAP2蛋白在制备检测1P等位基因杂合性缺失存在与否的生物标志物中的用途。
5.MAP2蛋白在制备1P等位基因杂合性缺失存在状态的决策树分析模型中的用途。
6.一种检测试剂盒,其特征在于,其含有权利要求1所述的人少突神经胶质瘤标志物MAP2蛋白。
7.一种诊断1p等位基因缺失的少突神经胶质瘤化疗敏感性的试剂盒,其特征在于,其含有权利要求1所述的MAP2蛋白。
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