[发明专利]一种分离板蓝根中芥子苷类化合物的方法

说明书

技术领域

本发明涉及板蓝根中芥子苷类化合物的分离，具体说，是涉及一种分离板蓝根中主要芥子苷类化合物：原告依春[(2(R)-羟基-3-丁烯基硫甙)，progoitrin]、表原告依春[(2(S)-羟基-3-丁烯基硫甙)，epiprogoitrin]及3-丁烯基硫甙(gluconapin)的方法。

背景技术

研究表明：板蓝根中的芥子苷类化合物主要为epiprogoitrin，progoitrin，gluconapin 和glucoraphenin，它们在总芥子苷类部位中的百分比依次为：56％，21％，17％，3％；表原告依春(epiprogoitrin)的降解产物表告依春(epigoitrin)是一种生物碱，具有抗流感病毒的作用；但原告依春(progoitrin)的降解产物告依春(goitrin)是一种甲状腺毒素，具有造成甲状腺肿大的作用；2010版中国药典已将RS-告依春作为板蓝根抗病毒药效的质量控制成分。

由于表告依春和告依春的生理作用具有较大差异，并且目前还没有对RS-告依春进行规模化手性分离纯化的工艺，以致严重限制了板蓝根药材的应用，因此，迫切需求能够大规模从板蓝根中手性分离RS-原告依春的方法，以满足对板蓝根中有效成分表告依春的获取、质量控制及其用途的研究需求。

但芥子苷是一种具有各种侧链R的(Z)-β-D-葡萄糖硫苷-N-肟基硫酸盐，根据侧链R的不同，通常分为脂肪族芥子苷、芳香族芥子苷和吲哚族芥子苷。由于硫酸基团的强极性及侧链R基团的相似性，芥子苷的分离十分困难。与芳香族芥子苷或吲哚族芥子苷相比，脂肪族芥子苷在ODS C18柱上因有更小的保留时间而选择性很差，这是因为脂肪族芥子苷侧链R基团的极性很大，尤其是侧链R基团中羟基的加入使得一些脂肪族芥子苷几乎不产生保留行为，而原告依春和表原告依春就为这类羟基脂肪族芥子苷的一对手性立体异构体，由本领域的公知常识可知，将原告依春和表原告依春进行有效手性分离的难度非常大，更不用说，进行高效、经济、高纯度分离这对手性异构体，也因此，目前还未见关于从板蓝根中有效分离主要芥子苷类化合物：原告依春[(2(R)-羟基-3-丁烯基硫甙)，progoitrin]、表原告依春[(2(S)-羟基-3-丁烯基硫甙)，epiprogoitrin]及3-丁烯基硫甙(gluconapin)的方法报道。

发明内容

本发明为了解决上述技术难题，提供了一种能从板蓝根中高效、经济、高纯度分离主要芥子苷类化合物：原告依春、表原告依春及3-丁烯基硫甙的方法。

为实现上述发明目的，本发明采用的具体技术方案如下：

一种分离板蓝根中芥子苷类化合物的方法，包括如下具体步骤：

a)用醇水溶剂回流提取板蓝根药材粉末；

b)将上述提取液在35～60℃减压浓缩到无醇溶剂；

c)将上述浓缩液加入到用蒸馏水平衡的酸性氧化铝柱中；

d)分别用2～9个柱体积的蒸馏水和2～6个柱体积的0.01～0.5mol/L的硝酸钾水溶液淋洗柱子，以每0.25～2个柱体积收集为一个流份；

e)合并含有芥子苷类化合物的所有流份，在35～60℃减压浓缩至干；

f)用甲醇对总芥子苷类化合物进行脱盐，并将得到的甲醇滤液在35～60℃减压浓缩到无甲醇溶剂；

g)用蒸馏水溶解总芥子苷类化合物，在-50℃冻干，得总芥子苷类化合物的固体粉末；

h)将所得到的总芥子苷类化合物的固体粉末用洗脱液配制成溶液后，加入到用洗脱液平衡的ODS-BP柱中；用1～10个柱体积的洗脱液淋洗柱子，即可分别收集到原告依春(progoitrin)、表原告依春(epiprogoitrin)及3-丁烯基硫甙(gluconapin)的流份；所述洗脱液为蒸馏水或0.01～0.5mol/L的硝酸钾水溶液；

i)当步骤h)中所用洗脱液为蒸馏水时，将收集到的progoitrin、epiprogoitrin及gluconapin的流份分别在40℃减压浓缩至无溶剂滴出，然后在-50℃冻干；当步骤h)中所用洗脱液为0.01～0.5mol/L的硝酸钾水溶液时，将收集到的progoitrin、epiprogoitrin及gluconapin的流份分别按步骤e)、f)、g)所述操作进行后处理；

j)重复步骤h)至步骤i)，即可分离得到progoitrin、epiprogoitrin及gluconapin的3个纯品的固体粉末。