[发明专利]一种酪蛋白活性单肽及其制备方法与应用有效
| 申请号: | 201010277790.X | 申请日: | 2010-09-10 |
| 公开(公告)号: | CN101993476A | 公开(公告)日: | 2011-03-30 |
| 发明(设计)人: | 赵谋明;崔春;赵海锋;张清丽 | 申请(专利权)人: | 华南理工大学 |
| 主分类号: | C07K7/06 | 分类号: | C07K7/06;C12P21/06;A23C9/13 |
| 代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 何淑珍 |
| 地址: | 510640 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 蛋白 活性 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种酪蛋白活性单肽,该活性单肽氨基酸序列如序列表中序列1所示。
2.权利要求1所述一种酪蛋白活性单肽的制备方法,其特征在于包括如下步骤:
(1)在50℃~55℃,pH 6.0-7.5的条件下加入木瓜蛋白酶对酪蛋白进行酶解,得酶解液;
(2)当水解度达到9%~10%时,90~95℃加热15~20min灭酶,终止酶解反应以控制生物活性肽的分子量;
(3)将灭酶活的酶解液依次通过膜分离、大孔树脂、凝胶色谱、反相高效液相进行分离纯化,即得所述生物活性肽。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于步骤(3)中将灭酶活的酶解液在4℃下以6000 g离心20分钟,将上清液经超滤,取分子量小于3000道尔顿的组分,采用大孔树脂NKA-II, 用10-20%(w/w)乙醇洗脱,收集洗脱液,接着采用Sephadex G-25,流动相为去离子水,检测波长220nm,按吸收峰顺序收集;经Sephadex G-25分离得到的具有较强活性的组分再经C18高效液相色谱分离纯化,分离条件为:5-40%乙腈和95-60%去离子水梯度洗脱,检测波长220nm,按吸收峰顺序收集。
4.权利要求1所述的酪蛋白活性单肽应用于酸乳发酵中,促进酸奶发酵,抑制酸奶后酸化。
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