[发明专利]一种肝素衍生的多糖混合物及其制备方法和药物组合物

说明书

技术领域

本发明涉及药物领域，更具体地涉及由一种肝素衍生的多糖混合物，及其制备方法与含有所述多糖化合物的药物组合物。

背景技术

肝素是动物来源(猪或牛)的硫酸多糖混合物，由于它们具有良好的抗血栓形成性质，因而得到了广泛应用，例如制备抗血栓形成药物、治疗心血管疾病的药物、和治疗脑血管疾病的药物等。

然而，肝素有许多缺陷，这些缺陷限制肝素的应用。一个主要缺陷是肝素用药过多可致自发性出血，故每次注射前应测定凝血时间。此外，肝素还可引起过敏反应、血小板减少、骨质疏松和自发性骨折。

肝素自发性出血危险很大，临床使用中必须监测凝血时间，这给医生和患者均带来很大不便。同时，血小板减少和骨质疏松等不良反应也让医生在使用中有所顾忌。因此，广大医药工作者希望找到一种优化方法，既保留肝素的高效抗血栓，又能减少其出血等不良反应。

临床实践证明，目前上市的低分子量肝素使用过程中无须监测凝血时间，并且在一定程度上降低了肝素长期使用产生的上述不良反应。基础研究表明，分子量较大的长链肝素会与血浆蛋白、巨噬细胞、内皮细胞、血小板、血小板因子4、造骨细胞等结合，从而导致上述不良反应。当肝素片段的分子量较低时，不但抗凝血因子IIa活性很低，也将大大降低使用肝素及现有低分子肝素导致的不良反应。但是，常规方法制备低分子肝素时，随着肝素分子量的降低，其抗血栓能力也逐渐下降。

因此，本领域迫切需要开发既具有优异抗血栓性质，且不良反应更低的肝素产品。

发明内容

本发明的目的就是提供一种具有优异抗血栓性质，分子量大于5000道尔顿的多糖含量低于5％，制备方法简单，且副作用小(如出血风险低)的肝素产品。

在本发明的第一方面，提供了一种肝素衍生的多糖混合物，所述混合物是肝素季铵盐在非羟基化惰性溶液介质中的降解产物，其特征在于，所述混合物具有下述特性：

-重均分子量为1500～4200道尔顿；

-抗凝血因子Xa的活性为100-150IU/毫克，抗凝血因子IIa的活性为0.001-10IU/毫克，且抗凝血因子Xa活性与抗凝血因子IIa活性的比值比≥10；

-在所述混合物中分子量大于5000道尔顿的肝素衍生的多糖的含量低于5％；

-在所述混合物中的构成多糖中，在其一端具有不饱和的4，5-葡糖醛酸2-O-硫酸酯结构单元；和

-所述的多糖混合物为碱金属盐或碱土金属盐形式。

在另一优选例中，所述多糖混合物的抗凝血因子Xa活性是120-150IU/毫克。

在另一优选例中，重均分子量是2000～4000道尔顿。

在另一优选例中，所述混合物为钠盐、钾盐、钙盐或镁盐形式。

在另一优选例中，所述混合物的抗凝血因子IIa活性为0.01-10IU/毫克。

在另一优选例中，所述混合物的抗凝血因子Xa活性与抗凝血因子IIa活性的比值≥15，较佳地≥20，更佳地≥50，最佳地≥100。

在另一优选例中，按下式计，所述混合物中分子量≥5000道尔顿的肝素衍生的多糖的含量Y≤5％：

较佳地，所述的含量Y≤3％；更佳地，所述的含量Y≤2％；最佳地Y≤1％。

在另一优选例中，所述的肝素是来源于牛、猪的肝素(即猪肝素或牛肝素)或其衍生物，如低分子肝素等。

在本发明的第二方面，提供了本发明上述的肝素衍生的多糖混合物的制备方法，包括步骤：

(a)在非羟基化惰性溶剂中，在季铵碱存在下，使得肝素季铵盐被降解，从而形成降解的肝素衍生的多糖；

(b)从反应体系中分离出降解的肝素衍生的多糖，并进行通过凝胶过滤或超滤去除分子量5000道尔顿以上的组分，从而获得分子量大于5000道尔顿的肝素衍生的多糖的含量低于5％、本发明第一方面中所述的肝素衍生的多糖混合物。

在另一优选例中，所述的非羟基化惰性溶剂，是指二氯甲烷、甲酰胺、二甲基甲酰胺或其它非羟基极性溶剂，优选二氯甲烷。

在另一优选例中，所述的肝素季铵盐优先选用长链铵如三氯、双氯甲铵盐及联苯胺等，更佳地为肝素苄乙氧铵盐。

在另一优选例中，所述的季铵碱优选为苄基三甲基氢氧化铵的醇溶液，如甲醇、乙醇或异丙醇溶液，如苄基三甲基氢氧化铵甲醇溶液(如25％或40％浓度等，w/v)。

在另一优选例中，在步骤(b)中，可以通过已知方法分离纯化：醇沉、活性炭吸附、透析、凝胶过滤和超滤，以获得符合要求的肝素衍生的多糖混合物。