[发明专利]一种检测唾液中HIV抗体的试纸条及其制备方法

权利要求书

1.一种检测唾液中HIV抗体的试纸条，其特征在于，包括样品垫(1)、与所述样品垫(1)一端紧密相连的含有胶体金颗粒标记物的玻璃纤维膜(2)、与所述玻璃纤维膜(2)另一端紧密相连的硝酸纤维素膜(3)、以及与所述纤维素膜(3)的另一端紧密相连的吸水纸(4)，所述样品垫(1)、玻璃纤维膜(2)、硝酸纤维素膜(3)和吸水纸(4)均设置于底板(7)上，所述硝酸纤维素膜(3)包括包被有HIV重组抗原的检测区(5)和包被有羊抗兔抗体的控制区(6)，所述胶体金颗粒标记物包括微信号放大系统和胶体金标记兔IgG抗体，所述微信号放大系统为胶体金颗粒-亲和素-生物素-抗人IgG抗体复合物。

2.根据权利要求1所述的检测唾液中HIV抗体的试纸条，其特征在于，所述胶体金颗粒-亲和素-生物素-抗人IgG抗体复合物的用量为0.65-0.9μg/cm²。

3.根据权利要求1所述的检测唾液中HIV抗体的试纸条，其特征在于，所述胶体金标记兔IgG抗体的用量为0.25-0.45μg/cm²。

4.根据权利要求1所述的检测唾液中HIV抗体的试纸条，其特征在于，所述HIV重组抗原为gp41和gp36，所述HIV重组抗原的用量为0.054-0.08μg/mm。

5.根据权利要求1所述的检测唾液中HIV抗体的试纸条，其特征在于，所述羊抗兔抗体为羊抗兔IgG抗体，所述羊抗兔抗体的浓度为4mg/ml，所述羊抗兔抗体的用量为0.09-0.22μg/mm。

6.一种检测唾液中HIV抗体的试剂卡，其特征在于，包括权利要求1-4任一项所述的试纸条。

7.一种制备权利要求1所述的检测唾液中HIV抗体的试纸条的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)按常规方法制备抗人IgG抗体、HIV重组抗原、以及胶体金标记兔IgG抗体；

(2)制备微信号放大系统

a、制备胶体金标记亲和素

将待标记亲和素预先在0.001～0.01mol/L的NaCl溶液中透析过夜，离心，调节胶体金液的pH值至9～10，标记亲和素以形成胶体金标记亲和素；

b、按常规方法制备生物素化抗人IgG抗体

c、完成微信号放大系统

将步骤a得到的胶体金标记亲和素和步骤b得到的生物素化抗人IgG抗体混合，连接得到胶体金-亲和素-生物素-抗人IgG抗体复合物，洗涤，即得微信号放大系统；

(3)按稀释参数20cm²/ml～40cm²/ml，将步骤(2)的胶体金-亲和素-生物素-抗人IgG抗体复合物、以及步骤(1)的胶体金标记兔IgG抗体喷洒到玻璃纤维膜上，干燥12个小时以上，备用；

(4)用包被缓冲液稀释HIV重组抗原，使其浓度为0.8mg/ml～1.5mg/ml，按膜液量0.16μl/mm～0.2μl/mm，将其细致均匀的喷到硝酸纤维素膜上，干燥12个小时以上，备用；用包被缓冲液稀释羊抗兔抗体，使其浓度为1.0mg/ml～2.0mg/ml，按膜液量0.18μl/mm～0.22μl/mm，将其细致均匀的喷到硝酸纤维素膜上，干燥12个小时以上，备用；

(5)将样品垫、步骤(3)的玻璃纤维膜、步骤(4)的硝酸纤维素膜、吸水纸按序粘贴于底板上，即得。

8.根据权利要求7所述的检测唾液中HIV抗体的试纸条的方法，其特征在于，所述步骤(3)中胶体金-亲和素-生物素-抗人IgG抗体复合物的用量为0.65-0.9μg/cm²，所述胶体金标记兔IgG抗体的用量为0.25-0.45μg/cm²。

9.根据权利要求7所述的检测唾液中HIV抗体的试纸条的方法，其特征在于，所述步骤(4)中HIV重组抗原的用量为0.054-0.08μg/mm；所述羊抗兔抗体的浓度为4mg/ml，用量为0.09-0.22μg/mm。