[发明专利]一种快速检测三聚氰胺的试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种三聚氰胺检测试剂盒，其特征在于所述的试剂盒包括蛋白沉淀剂A、淋洗试剂B、洗脱试剂C以及显示剂D，所述的蛋白沉淀剂A选自下列之一：甲醇、乙腈、1wt％三氯乙酸水溶液、2wt％乙酸铅水溶液、1wt％三氯乙酸水溶液与乙腈按照体积比1∶0.5～2混合得到的混合溶液、1wt％亚铁氰化钾水溶液与2wt％乙酸锌水溶液按照体积比1∶1混合得到的混合溶液；所述的淋洗试剂B为30～60mmol/L盐酸溶液；所述的洗脱试剂C为3～6vol％氨化甲醇，所述的显示剂D选自下列之一：0.5wt％苦味酸水溶液、0.5wt％氯化汞水溶液、0.5wt％三聚氰酸水溶液、体积比为1∶0.5～1.2的0.5wt％氯化汞水溶液与0.5wt％三聚氰酸水溶液形成的混合溶液。

2.如权利要求1所述的三聚氰胺检测试剂盒，其特征在于所述的试剂盒包括蛋白沉淀剂A、淋洗试剂B、洗脱试剂C以及显示剂D，所述的蛋白沉淀剂A为1wt％三氯乙酸水溶液与乙腈按照体积比1∶1昆合得到的混合溶液；所述的淋洗试剂B为50mmol/L盐酸溶液；所述的洗脱试剂C为5vol％氨化甲醇；所述的显示剂D为体积比为1∶1的0.5wt％氯化汞水溶液与0.5wt％三聚氰酸水溶液形成的混合溶液。

3.如权利要求1或2所述的三聚氰胺检测试剂盒在快速检测三聚氰胺中的应用，其特征在于所述的应用具体包括：以三聚氰胺含量为2.0mg/L的原料乳或者加工后纯牛奶为标准样品，以待测的原料乳或者加工后纯牛奶为样品，分别在相同条件下依次经步骤(1)～(3)处理后，利用化学浊度法判断待测的样品中三聚氰胺含量是否超过2.0mg/L：

(1)原料乳或者加工后纯牛奶中加入蛋白沉淀剂A，经过滤除去蛋白，得到滤液；所述原料乳或者加工后纯牛奶与蛋白沉淀剂A的投料体积比为1∶0.8～1.2；

(2)取SCX+C8固相萃取柱，活化后使步骤1)所得滤液过SCX+C8固相萃取柱，经过淋洗试剂B除杂净化，然后用洗脱试剂C进行洗脱，所得洗脱液蒸干；

(3)在步骤(2)得到的蒸干残留物中加入显示剂D，混匀后得到的显示后溶液吸入酶标板内。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述的化学浊度法采用目视比浊度法和/或浊度计法，所述的目视比浊度法为：经步骤(3)处理后，如果样品所得溶液显示乳白色浑浊，则样品中三聚氰胺含量大于2.0mg/L。

5.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述的化学浊度法采用目视比浊度法和/或浊度计法，所述的浊度计法为：将步骤(3)所得溶液使用浊度计以与步骤(3)相同体积用量的显示剂D为空白测量浊度值，如果样品的浊度值大于标准样品的浊度值，则样品中三聚氰胺含量大于2.0mg/L。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于标准样品的浊度值采用多次测量进行确定。

7.如权利要求5所述的应用，其特征在于所述的浊度计法采用单波长检测，在405nm或450nm的单波长条件下测定浊度值。

8.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述的SCX+C8固相萃取柱的规格为300mg/6mL、500/6mL或1000/6mL。

9.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述显示剂D的加入量以蒸干残留物的质量计为2～5mL/g。

10.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述的步骤(1)～步骤(3)具体如下：

(1)取原料奶或者加工后袋装纯牛奶加入蛋白沉淀剂A，混匀后过滤，收集滤液待用；所述原料奶或者加工后袋装纯牛奶与蛋白沉淀剂A的投料体积比为1∶1；

(2)取SCX+C8混合固相萃取柱，先用甲醇2～3mL、水2～3mL、淋洗试剂B2～3mL润洗活化柱子，然后加上述2～3mL滤液过柱，先用2～3mL淋洗试剂B、2～3mL甲醇淋洗除杂，最后用2～3mL洗脱试剂C洗脱，收集洗脱液，将收集的洗脱液在沸水浴中蒸干备用；所述的SCX+C8混合固相萃取柱的规格为300mg/6mL；

7(3)在上述蒸发残留物管中加显示剂D 0.1～0.5mL，涡旋混合器混匀，并移入酶标板。