[发明专利]调控胚胎干细胞及早期胚胎的胚层分化的方法和试剂

权利要求书

1.钙调神经磷酸酶-活化T细胞核因子信号通路的调节剂的用途，用于制备调节胚胎干细胞分化和胚胎发育的组合物。

2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的调节剂是抑制剂，其用于制备抑制胚胎干细胞分化和胚胎发育的组合物。

3.如权利要求2所述的用途，其特征在于，所述的抑制剂选自：环孢素A；FK506；VIVIT；GM6001；PP2；特异性干扰钙调神经磷酸酶基因表达的干扰分子；特异性结合钙调神经磷酸酶的抗体或配体。

4.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的调节剂是促进剂，其用于制备促进胚胎干细胞分化和胚胎发育的组合物。

5.如权利要求4所述的用途，其特征在于，所述的促进剂是一表达载体，其中含有钙调神经磷酸酶编码基因或活化T细胞核因子编码基因；

或者，所述的促进剂是促进Ca²⁺信号通路的物质。

6.如权利要求1-5任一所述的用途，其特征在于，

所述的钙调神经磷酸酶包括亚基：CnA；或

所述的活化T细胞核因子包括：NFATc1、NFATc2、NFATc3、NFATc4。

7.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的组合物还用于：激活下游靶基因Src或促进上皮-间充质细胞转换。

8.一种筛选调节胚胎干细胞分化和胚胎发育的潜在物质的方法，其特征在于，所述的方法包括：

(1)将候选物质与含有钙调神经磷酸酶-活化T细胞核因子信号通路的体系接触；

(2)检测候选物质对钙调神经磷酸酶-活化T细胞核因子信号通路的影响；

若所述候选物质提高钙调神经磷酸酶和/或活化T细胞核因子的表达或活性，则表明该候选物质是促进胚胎干细胞分化和胚胎发育的潜在物质；

若所述候选物质抑制钙调神经磷酸酶和/或活化T细胞核因子的表达或活性，则表明该候选物质是抑制胚胎干细胞分化和胚胎发育的潜在物质。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，步骤(1)包括：在测试组中，将候选物质加入到含有钙调神经磷酸酶-活化T细胞核因子信号通路的体系中；和/或

步骤(2)包括：检测测试组的体系中钙调神经磷酸酶和/或活化T细胞核因子的表达或活性，并与对照组比较，其中所述的对照组是不添加所述候选物质的含有钙调神经磷酸酶-活化T细胞核因子信号通路的体系；

如果测试组中钙调神经磷酸酶和/或活化T细胞核因子的表达或活性在统计学上高于对照组，就表明该候选物质是促进胚胎干细胞分化和胚胎发育的潜在物质；

如果测试组中钙调神经磷酸酶和/或活化T细胞核因子的表达或活性在统计学上低于对照组，就表明该候选物质是抑制胚胎干细胞分化和胚胎发育的潜在物质。

10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的体系中还包含Src表达盒，

步骤(2)包括：检测候选物质对Src表达的影响；

若所述候选物质促进Src表达，则表明该候选物质是促进胚胎干细胞分化和胚胎发育的潜在物质；

若所述候选物质抑制Src表达，则表明该候选物质是抑制胚胎干细胞分化和胚胎发育的潜在物质。