[发明专利]一种利用球形节杆菌进行强心苷苷元类化合物C16,17位脱氢的方法

权利要求书

1.一种利用球形节杆菌进行强心苷苷元类化合物C16，17位脱氢的方法，其特征在于：步骤是：

(1)种子与发酵培养：取球形节杆菌ATCC31250菌种接种于一级种子培养基中，140-180r/min、30-34℃、培养20-30h，得到种子培养液，以5％-10％接种量转接于新鲜的发酵培养基，进行二级发酵培养，得到菌体发酵液；

(2)转化：在菌体发酵液中加入强心苷苷元类化合物，30-35℃，150-200r/min转化70-80h后终止反应；

(3)产物的提取与精制：步骤(2)转化反应结束后，抽滤，分离菌丝体和发酵液，分别用有机溶剂萃取菌丝体和发酵液数次，合并萃取液，干燥，减压浓缩，浓缩后采用硅胶色谱柱分离得到强心苷苷元类化合物C16，17位脱氢产物；

所述的球形节杆由美国典型微生物菌种保藏中心保存，编号为：ATCC 31250。

2.根据权利1所述的利用球形节杆菌进行强心苷苷元类化合物C16，17位脱氢的方法，其特征在于：所述一级种子培养基和二级发酵培养采用的培养基组成(g/L)：葡萄糖5-20，玉米浆5-15，蛋白胨2-8，磷酸二氢钾2-5，pH7.0-7.4。

3.根据权利1所述的利用球形节杆菌进行强心苷苷元类化合物C16，17位脱氢的方法，其特征在于：所述强心苷苷元类化合物投入的终浓度为：0.1-1g/L。

4.根据权利1所述的利用球形节杆菌进行强心苷苷元类化合物C16，17位脱氢的方法，其特征在于：所述强心苷苷元类化合物为异羟基洋地黄毒苷元、3-氧代异羟基洋地黄毒苷元或1，2-烯-3-氧代异羟基洋地黄毒苷元之一。

5.根据权利1所述的利用球形节杆菌进行强心苷苷元类化合物C16，17位脱氢的方法，其特征在于：所述强心苷苷元类化合物结构式如下：

其中：

R₁为氧代；H；α或β构型的OH；乙酰基；

R₂为氧代；H；α或β构型的OH；乙酰基；

R₃为α或β构型的H；OH；CH₃；乙酰基；醛基；

R₄为α或β构型的H；OH；CH₃；乙酰基；醛基；

R₅为α或β构型的H；OH；CH₃；乙酰基；醛基；

C₁C₂为CH₂-CH₂；CH＝CH。