[发明专利]基于纳米微粒的生物标志物的化学发光检测方法及应用

权利要求书

1.基于纳米微粒的生物标志物的化学发光检测方法，其特征在于，使用聚苯乙烯96孔板作为载体结合包被抗体，与标准溶液或者生物样本中的标志物结合后，加入适配体修饰的金纳米微粒，形成三明治复合物，经NH2OH/HAuCl4放大后，进行化学发光定量测定，其包括步骤：

1)将包被抗体结合到聚苯乙烯96孔板上制备载体抗体复合物，封闭备用；

2)制备金纳米微粒；

3)制备链霉亲合素修饰的金纳米微粒；

4)制备针对目标抗原适配体DNA修饰的金纳米微粒；

5)NH₂OH/HAuCl₄放大后，加入鲁米诺、AgNO₃底物进行化学发光测定。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的标志物的一端与包被抗体结合，另一端与针对该标志物的适配体修饰的金纳米微粒结合。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的方法中以适配体DNA识别抗原。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的适配体首先修饰至金纳米微粒上，然后进行免疫反应。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的抗体为单克隆抗体，采用共价键固定至96孔板表面。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，该步骤结束后，标准样品和生物样本加入到96孔板上。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，该步骤结束后，以适配体修饰的金纳米微粒加入到96孔板中。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，该步骤结束后，加入发光底物鲁米诺和AgNO3，进行化学发光检测；或，加入一定浓度的NH2OH/HAuCl4加入到96孔板中，进一步放大金纳米微粒，随后加入发光底物鲁米诺和AgNO3，进行化学发光检测。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述的金纳米微粒放大步骤可采用1次以上。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的生物样本是血清、唾液、尿液或头发。