[发明专利]温郁金1号的组织培养法无效
申请号: | 201010265480.6 | 申请日: | 2010-08-24 |
公开(公告)号: | CN101953300A | 公开(公告)日: | 2011-01-26 |
发明(设计)人: | 陈丽闽;毛碧增 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 杭州中成专利事务所有限公司 33212 | 代理人: | 金祺 |
地址: | 310027 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 郁金 组织培养 | ||
1.温郁金1号的组织培养法,其特征是依次包括以下步骤:
1)、将无病斑、无虫瘿且健壮饱满的温郁金1号块根放入生化培养箱进行催芽,直至长成0.5~2.0cm高的小芽;培养条件为:26~28℃暗培养;
2)、割取上述小芽进行流水冲洗;
3)、将上述流水冲洗后的小芽经常规消毒后,剥取3~5毫米大小的茎尖作为外植体接种到无菌苗培养基上进行培养;培养条件为:16小时光照,光照强度30~40μmol m-2.s-1,温度为27±1℃;8小时暗培养,温度为21±1℃;上述光照和暗培养交替进行;
4)、待上述茎尖长至1.0~2.0cm高时进行割取作为小苗Ⅰ;将上述小苗Ⅰ接种到不定芽诱导培养基上进行培养;培养条件为:16小时光照,光照强度30~40μmol m-2.s-1,温度为27±1℃;8小时暗培养,温度为21±1℃;上述光照和暗培养交替进行;
5)、待从小苗Ⅰ上诱导出的不定芽Ⅰ长到1.0~3.0cm高时,割取所述不定芽Ⅰ作为小苗Ⅱ;将上述小苗Ⅱ接种到增殖培养基上进行培养;培养条件为:16小时光照,光照强度30~40μmol m-2.s-1,温度为26~28℃;8小时暗培养,温度为20~22℃;上述光照和暗培养交替进行;
6)、待上述小苗Ⅱ上长出的不定芽Ⅱ长到3.0~6.0cm高时,割取所述不定芽Ⅱ作为小苗Ⅲ;将此小苗Ⅲ接种到生根培养基中;培养条件为:16小时光照,光照强度40~50μmol m-2.s-1,温度为26~28℃;8小时暗培养,温度为20~22℃;上述光照和暗培养交替进行;
7)待上述小苗Ⅲ长到高4~8cm且具有至少3条长于2cm的根时,得可出瓶种植的种苗。
2.根据权利要求1所述的温郁金1号的组织培养法,其特征是所述步骤2)为:将温郁金1号的小芽放入纱袋中,无菌水冲洗1~2小时。
3.根据权利要求2所述的温郁金1号的组织培养法,其特征是步骤3)中的无菌苗培养基为:1/2MS基本培养基+白砂糖20~30g/l+琼脂4~9g/l,pH为5.5~6.0。
4.根据权利要求3所述的温郁金1号的组织培养法,其特征是步骤4)中的不定芽诱导培养基为:MS基本培养基+TDZ 0.05~0.5mg/l+白砂糖20~30g/l+琼脂4~9g/l,pH为5.5~6.0。
5.根据权利要求4所述的温郁金1号的组织培养法,其特征是步骤5)中的增殖培养基为:MS基本培养基+TDZ 0.05~0.5mg/l+白砂糖20~30g/l+琼脂4~9g/l,pH为5.5~6.0。
6.根据权利要求5所述的温郁金1号的组织培养法,其特征是:步骤6)中的生根培养基为:1/2MS基本培养基+白砂糖15~20g/l+琼脂4~10g/l,pH为5.5~6.0。
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