[发明专利]一种消炎退热颗粒的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药制剂的检测方法，具体的说，本发明涉及中成药消炎退热颗粒的检测方法。

背景技术

消炎退热颗粒是一种清热解毒，凉血消肿的中成药，在我国已上市多年，临床用于感冒发热，上呼吸道感染，咽喉肿痛及各种疮疖肿痛等疗效肯定。消炎退热颗粒由中药材大青叶、蒲公英、紫花地丁和甘草按中成药合剂的常规工艺制备而成。该产品的质量标准收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》中药成方制剂第五册，标准编号为WS₃-B-1008-91。该标准中没有任何鉴别方法，且没有任何定量检测的方法，不利于控制消炎退热颗粒的产品质量。

发明内容

本发明的目的是为了克服目前消炎退热颗粒质量标准中没有任何鉴别方法、且没有任何定量检测的方法，不利于控制产品质量的缺点，提供一种专属性强，且更能准确控制产品质量的消炎退热颗粒的检测方法。

本发明在原质量控制方法中增加了：(1)采用薄层色谱法，以咖啡酯为对照品，鉴别消炎退热颗粒中含有蒲公英；(2)采用高效液相色谱法测定消炎退热颗粒中甘草酸的含量。

一、薄层色谱法鉴别消炎退热颗粒中含有蒲公英：

实验仪器、试药与试剂

实验仪器：层析板、层析缸、点样毛细管、紫外光灯等

试药与试剂：咖啡酯对照品(中国药品生物制品检定所)

消炎退热颗粒样品、缺蒲公英的消炎退热颗粒阴性对照样所用试剂均为分析纯

供试品溶液制备：取本品20g，加5％甲酸的甲醇溶液30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，滤过，滤液用乙酸乙酯振摇提取3次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。

对照品溶液制备：取咖啡酯对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。

缺蒲公英的消炎退热颗粒阴性样制备：按供试品溶液制备方法制备。

照薄层色谱法(中国药典2005年版附录VIB)试验，吸取上述溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸丁酯-甲酸-水(14∶5∶5)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干。

显色：将薄层板置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。重复性良好且阴性无干扰。

以上结果表明，此方法可以做为消炎退热颗粒中蒲公英薄层专属鉴别。

二、高效液相色谱法测定消炎退热颗粒中甘草酸的含量的较佳条件是：

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂：乙腈-0.05％磷酸溶液(80∶20)为流动相；检测波长为237nm。理论板数按甘草酸峰计应不低于3000。

对照品溶液的制备  取甘草酸对照品适量，精密称定，加70％乙醇制成每1ml含甘草酸0.1mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备  取本品，研细，取2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％乙醇20ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液1ml，置5ml量瓶中，加入70％乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。

含量测定方法的方法学考察：

1、线性关系：精密称取甘草酸对照品适量，置10ml量瓶中，加70％乙醇制成每1ml含甘草酸1mg的溶液，摇匀；精密吸取0.25、0.5、1.0、2.0ml，分别置10ml量瓶中，加稀乙醇稀释至刻度，摇匀。分别进样20μl，注入液相色谱仪，测定芍药苷峰面积。以峰高为纵坐标，以甘草酸浓度为横坐标，绘制标准曲线，计算得回归方程：Y＝64.5X+0.961，r＝0.9989。结果表明，甘草酸对照品溶液在0.2～0.025mg范围内具有良好的线性关系。

2、精密度实验：精密吸取浓度为0.1mg/ml的对照品溶液，按液相色谱条件，重复进样5次，测定结果见表1。

表1  精密度试验结果

以上结果表明，本方法精密度良好。

3、重复性试验：精密称定样品5份，每份约2g，照液相色谱条件测定。结果见表2。

表2

以上结果表明，本方法重复性良好。

4、回收率实验：精密称定已知含量的样品5份，每份约2g，分别精密加入甘草酸照品，采用加样回收试验，按色谱条件测定，计算回收率，结果见表3.

表3

以上结果表明，本方法回收率良好。