[发明专利]一种毛两面针素的提取方法

说明书

技术领域：

本发明属于中药化学领域，涉及一种毛两面针素的提取方法。

背景技术：

毛两面针素(Toddalolactone)，又名飞龙掌血酯，为香豆素类化合物；

分子式C₁₆H₂₀O₆，分子量：308.33；

毛两面针素(Toddalolactone)

现有文献仅对两面针、毛两面针及飞龙掌血的化学成分分析中分离得到毛两面针素，对其提取方法、药理等方面的研究还处于空白。

毛两面针素存在于芸香科(Rutaceae)花椒属(Zanthoxylum L.)植物两面针(Zanthoxylumnitidum(Roxb.)DC.)、毛两面针(Zanthoxylum nitidum var.fastuosum)、飞龙掌血(Toddaliaasiatica(L.)Lam.[Paullinia asiatica L.])中。这些植物的根的主要化学成分为生物碱和香豆素类化合物。

目前一般的干燥方法有机械法、化学法和加热(冷冻)法。这些方法要么设备庞大、干燥费用高，要么干燥速度慢、处理量小。微波干燥不同于传统干燥方式，其热传导方向与水分扩散方向相同，利用频率为915～2450MHz的微波能量使物料本身发热升温、蒸发水分进行干燥的方法。与传统干燥方式相比，具有干燥速率大、节能、生产效率高、干燥均匀、清洁生产、易实现自动化控制和提高产品质量等优点，因而在于燥的各个领域越来越受到重视，我国微波干燥技术现已用于食品工业、材料化工、医药工业、矿产开采业、陶瓷工业、实验室分析、湿天然橡胶加工等方面。

发明内容：

本发明的目的在于提供一种毛两面针素的提取方法，填补了毛两面针素提取工艺的空白。

本发明的目的是通过以下方案实现的：

(1)提取：将富含毛两面针素的药材粉碎，加入极性有机溶剂或其含低于20％水的混合溶剂，提取1-4次，每次1-4小时，合并提取液，浓缩；

(2)酸碱除杂：将上述步骤(1)中的浓缩液用碱液溶解，过滤，滤液加酸水溶液，抽滤，得滤饼；

(3)纯化：将上述步骤(2)所得滤饼用少量乙醇溶解，上柱层析，有机溶剂梯度洗脱，得到毛两面针素洗脱液，回收试剂得毛两面针素浸膏；

(4)精制：将上述毛两面针素浸膏用石油醚-氯仿热回流饱和溶解，冷却，静置结晶，再用石油醚洗涤结晶，微波干燥即得高含量毛两面针素。

步骤(1)所述富含毛两面针素的原料为两面针、毛两面针或飞龙掌血的干燥根。

步骤(1)所述极性有机溶剂为甲醇、乙醇、丙酮，料液比为1∶3-8(w/w)；提取方法为加热回流提取法或渗漉提取法。

步骤(1)所述提取液浓缩至原体积的1/5-1/15。

步骤(2)所述碱液可选氨水、氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸氢钠、碳酸钠的水溶液，pH为10-12；所述酸水溶液为0.5-5％的盐酸或硫酸水溶液，调溶液pH至2-3，50-80℃加热10-20分钟，冷却至室温，放置2-5小时，抽滤。

步骤(3)中所述柱层析填料为硅胶或大孔树脂。

所述硅胶100-200目硅胶。

所述大孔树脂为ADK-17、D101、AB-8、HPD100。

步骤(3)中所述洗脱剂为环己烷、氯仿、丙酮、甲醇中的一种或几种混合溶液梯度洗脱。

步骤(3)中所述洗脱剂可为氯仿、氯仿-甲醇(19∶1、9∶1、6∶4)、甲醇梯度洗脱，或环己烷、乙酸乙酯-丙酮(17∶3、6∶4、1∶1)、丙酮梯度洗脱。

本发明具有以下优点：本发明方法采用酸碱除杂，操作简单，除去了大部分亲脂性杂质，且减少了与酸碱的接触时间，尽可能保留了毛两面针素的结构及其活性；柱层析分离纯化，处理量大，洗脱效果好，产品纯度高。

具体实施方式：

实施例1：

将飞龙掌血粉碎，取10kg投入小型提取罐中，加入30L85％乙醇溶液加热回流提取3次，每次2小时，合并提取液，减压蒸馏回收乙醇至溶液体积为原体积的1/10，用pH为10的氨水溶解，过滤，滤液加5％盐酸溶液调pH至2，于60℃恒温加热15分钟，冷却至室温，静置5小时，抽滤，得滤饼，将滤饼用少量乙醇溶解，通过D101大孔吸附树脂柱，用氯仿、氯仿-甲醇19∶1、9∶1、6∶4、甲醇进行梯度洗脱，收集毛两面针素部位，回收溶媒后得毛两面针素浸膏，用石油醚-氯仿加热回流饱和溶解，冷却，静置结晶，结晶再用石油醚洗涤，微波干燥即得毛两面针素，用HPLC法检测得含量为99.0％。

实施例2：