[发明专利]玉米须多糖脱色和脱蛋白工艺的方法

说明书

技术领域

本发明属于植物有效成分精制加工处理方法领域，尤其指玉米须多糖精制中脱色和脱蛋白的方法。

背景技术

玉米的“头发”即玉米须(Stigma maydis)是禾本科植物玉蜀黍的花柱和柱头，是常用中药。祖国医学认为，玉米须味淡、性平，有利尿、平肝、利胆等功效。现代医学研究认为，玉米须含脂肪油、皂苷、生物碱、黄酮类、维生素K3、抗坏血酸、有机酸等，具有利尿、降血压、降血糖、利胆、止血、抑菌及增强免疫、抗癌等多种功效。已有学者对其水煎剂的降糖作用进行了研究，玉米须多糖在玉米须中含量达4％，是玉米须最主要的水溶性成分之一。大量试验证明多糖具有抗病毒、增强免疫力、抗肿瘤、延缓衰老、降血糖、抗凝血等多种功效。而多糖中的色素将影响多糖的提取及精制，所以要将多糖中的色素除去，提高多糖的药理作用；提取粗多糖除了有色素，还有很多蛋白质，影响多糖的组成及化学结构的分析，也影响其生物活性的研究。因此，对玉米须多糖进行了脱色素、脱蛋白实验研究，以提高其纯度，也为其结构及其构效关系等理论研究、工业化提供基础数据。

第一部分脱色

植物多糖常用的脱色方法有活性炭、双氧水、树脂、三氧化铝柱层析、静态混合器等。由于植物药材的不同、实验室条件等不同，脱色方法也不同，对于植物来源的多糖，所含色素大多是负性离子，用活性炭脱色效果不好；还有一些与糖结合的色素，这些色素可以用双氧水氧化脱色。活性炭和双氧水脱色由于简单易行，被广泛应用，但是在实际应用应进行正交试验优化最佳脱色条件。

第二部分脱蛋白

植物多糖常用的脱蛋白工艺方法常用sevag法、酶法、鞣酸法、三氯乙酸法、氯化钙法、盐酸法以及大孔吸附树脂法等多种方法。sevag法使蛋白乳化，但氯仿是二类溶剂，为有毒物质，容易造成溶剂残留；三氯乙酸法易引起多糖的降解，不宜应用在工业生产中；鞣酸法脱蛋白多糖成分损失较小，但不能除去表观色素；酶法除蛋白操作条件温和、无污染，蛋白质的去除率高。尽管sevag法能够达到除蛋白纯化多糖的目的，但sevag法试剂用量大，毒害大；本人曾用酶法除玉米须多糖中的蛋白质，效果显著，且多糖损失率低，故考虑将酶法和sevag试剂两者合用，即减少了试剂的用量，又可能达到较好的结果。

发明内容

本发明提供一种玉米须多糖脱色和脱蛋白工艺方法的应用，目的在于提供一种效率高、成本低、操作简单、重复性好的双氧水脱色、sevag+酶脱蛋白的工艺。多糖的损失较小，适合工业化生产。本发明优选为以下列步骤：

1、工艺流程

玉米须→备料→脱脂→水提→浓缩→透析→脱色→醇析→脱蛋白→干燥→玉米须多糖

2、玉米须粗多糖的提取

①备料：选取无虫蛀、无霉变、新鲜的玉米须为原料，洗净、干燥、粉碎，过40目筛，待用。

②脱脂：玉米须粉料加入95％乙醇，浸泡过夜，以除去脂溶性杂质。真空过滤，滤饼再用相同浓度乙醇处理一次，待用；回收乙醇，循环使用。

③水提：将脱脂后的药材粉料投入圆底烧瓶中，加入10~20倍量的的去离子水，搅拌，浸泡24h后，于80~90℃加热30min，提取3次，合并提取清液，待用。

④透析：把玉米须多糖澄清液装入透析袋中，用去离子水或蒸馏水透析48h左右，以去除无机盐、低分子量杂质，透析处理后，取出透析内液，待用。

⑤浓缩：把浸提清夜投入真空旋转蒸发仪中浓缩，减压、低温浓缩至料液原体积1/5左右，得浓缩液，待用。

3、玉米须粗多糖的脱色

⑥脱色：把浓缩液投入圆底烧瓶中，在搅拌下加入少量浓度为20~30％的双氧水，样液比为1∶0.15混合均匀，加热，脱色时间2h，加热温度50℃，pH值为6，趁热过滤，得脱色液，加热蒸去残留双氧水(或同④透析去残留双氧水)待用。

4、玉米须粗多糖的脱蛋白

⑦醇析：把脱色液投入烧杯中，加入适量的95％乙醇，使料液中乙醇浓度为70％~75％(V/V)，搅拌、混合均匀，静止于冰箱中，醇析过夜，离心分离，收集液相回收乙醇，待用。

⑧脱蛋白：根据实验情况可以选择三种方法中的一种

第一种酶法

把玉米须多糖加适量去离子水或蒸馏水溶解，加木瓜蛋白酶，酶底比1.0％、PH值5.5、体系在水浴中水解1.5h，温度为40℃，反应完后沸水浴灭酶10min。离心，除沉淀，待用。

第二种sevag法