[发明专利]一种检测都柏林念珠菌的引物、探针及试剂盒有效
| 申请号: | 201010260408.4 | 申请日: | 2010-08-20 | 
| 公开(公告)号: | CN102373270A | 公开(公告)日: | 2012-03-14 | 
| 发明(设计)人: | 吴秉铨;高建平 | 申请(专利权)人: | 福建泰普生物科学有限公司 | 
| 主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11 | 
| 代理公司: | 北京康信知识产权代理有限责任公司 11240 | 代理人: | 吴贵明 | 
| 地址: | 361009 *** | 国省代码: | 福建;35 | 
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 检测 都柏林 念珠菌 引物 探针 试剂盒 | ||
1.一种用于检测都柏林念珠菌的探针,其特征在于,所述探针具有SEQ ID No.3的核苷酸序列。
2.一种用于检测都柏林念珠菌的试剂盒,包括清洗液A、清洗液B、DNA提取液、提取固形物、CD-PCR反应液、Taq DNA聚合酶、尿嘧啶N-糖基化酶、内参照、阴性对照以及阳性对照,其特征在于,所述CD-PCR反应液包括引物及权利要求1所述的探针;
所述引物由引物F和引物R组成,所述引物F具有SEQ ID No.1的核酸序列,引物R具有SEQ ID No.2的核酸序列。
3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述内参照物为含大肠杆菌基因stx2A片段的质粒,所述内参照物的引物F具有SEQ ID No.4的核苷酸序列,所述内参照物的引物R具有SEQ ID No.5的核苷酸序列,所述内参照物的探针具有SEQ ID No.6的核苷酸序列。
4.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述DNA提取液包括Triton X-100、NP-40以及正辛酸,所述Triton X-100所占体积百分比为0.1-1%,所述NP-40所占体积百分比为0.1-1%,所述正辛酸的浓度为0.2mol/L。
5.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述CD-PCR反应液还包括超纯水、缓冲液、Mg2+、dATP、dGTP、dCTP以及dUTP。
6.一种检测都柏林念珠菌的方法,其特征在于,以被检测样品的总DNA为模板,利用权利要求2-5中任一项所述的试剂盒进行PCR检测。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述PCR检测的反应条件为:37℃-2分钟,95℃-5分钟,93℃-20秒,55℃-1分钟,循环次数为35次。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述检测样品可以是痰液、尿液、血液、支气管分泌物、穿刺液或者胸腹水。
9.权利要求2-5中任一项所述的试剂盒在检测都柏林念珠菌中的应用。
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