[发明专利]一种检测都柏林念珠菌的引物、探针及试剂盒有效

专利信息
申请号: 201010260408.4 申请日: 2010-08-20
公开(公告)号: CN102373270A 公开(公告)日: 2012-03-14
发明(设计)人: 吴秉铨;高建平 申请(专利权)人: 福建泰普生物科学有限公司
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11
代理公司: 北京康信知识产权代理有限责任公司 11240 代理人: 吴贵明
地址: 361009 *** 国省代码: 福建;35
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摘要:
搜索关键词: 一种 检测 都柏林 念珠菌 引物 探针 试剂盒
【权利要求书】:

1.一种用于检测都柏林念珠菌的探针,其特征在于,所述探针具有SEQ ID No.3的核苷酸序列。

2.一种用于检测都柏林念珠菌的试剂盒,包括清洗液A、清洗液B、DNA提取液、提取固形物、CD-PCR反应液、Taq DNA聚合酶、尿嘧啶N-糖基化酶、内参照、阴性对照以及阳性对照,其特征在于,所述CD-PCR反应液包括引物及权利要求1所述的探针;

所述引物由引物F和引物R组成,所述引物F具有SEQ ID No.1的核酸序列,引物R具有SEQ ID No.2的核酸序列。

3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述内参照物为含大肠杆菌基因stx2A片段的质粒,所述内参照物的引物F具有SEQ ID No.4的核苷酸序列,所述内参照物的引物R具有SEQ ID No.5的核苷酸序列,所述内参照物的探针具有SEQ ID No.6的核苷酸序列。

4.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述DNA提取液包括Triton X-100、NP-40以及正辛酸,所述Triton X-100所占体积百分比为0.1-1%,所述NP-40所占体积百分比为0.1-1%,所述正辛酸的浓度为0.2mol/L。

5.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述CD-PCR反应液还包括超纯水、缓冲液、Mg2+、dATP、dGTP、dCTP以及dUTP。

6.一种检测都柏林念珠菌的方法,其特征在于,以被检测样品的总DNA为模板,利用权利要求2-5中任一项所述的试剂盒进行PCR检测。

7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述PCR检测的反应条件为:37℃-2分钟,95℃-5分钟,93℃-20秒,55℃-1分钟,循环次数为35次。

8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述检测样品可以是痰液、尿液、血液、支气管分泌物、穿刺液或者胸腹水。

9.权利要求2-5中任一项所述的试剂盒在检测都柏林念珠菌中的应用。

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