[发明专利]一种利用血清痕量基因组DNA进行HLA基因分型的方法有效
| 申请号： | 201010258763.8 | 申请日： | 2010-08-19 |
| 公开（公告）号： | CN101914622A | 公开（公告）日： | 2010-12-15 |
| 发明（设计）人： | 徐东平;刘妍;许智慧;李晓东;钟彦伟;戴久增;王琳;王耀 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第三〇二医院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 11129 | 代理人： | 王素菊 |
| 地址： | 100039 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 血清 痕量 基因组 dna 进行 hla 基因 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种以血清为样本进行HLA基因分型的方法，其特征是：将血清裂解释放DNA，乙醇沉淀提取DNA，应用序列特异性引物巢式PCR方法扩增出HLA基因外显子2和外显子3的DNA序列进行HLA基因分型；其中，外引物具有SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列，内引物具有SEQ ID NO：3～NO：8所示的核苷酸序列；且在PCR反应时，加入Pfu DNA聚合酶和普通Taq DNA聚合酶。
2.权利要求1所述的方法，所述裂解是少量血清用异硫氰酸胍/LiCl2裂解释放DNA。
3.权利要求1所述的方法，所述基因扩增前，调整内外引物的浓度，第一轮内外引物浓度5倍稀释，终浓度为20nmol/L；第二轮内外引物浓度不稀释，终浓度为100nmol/L。
4.权利要求1所述的方法，所用的Pfu DNA聚合酶与普通Taq DNA聚合酶的体积比是1∶10。
5.权利要求1所述的方法，在PCR反应之前，在反应体系中预先加入橙黄G。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国人民解放军第三〇二医院，未经中国人民解放军第三〇二医院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201010258763.8/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
