[发明专利]一种草莓脱毒快繁技术

权利要求书

1.一种草莓脱毒快繁技术，其特征是：该技术包括花药培养脱毒、超低温处理脱毒，具体按如下步骤进行：

(1)花药培养脱毒：将取自于田间健壮草莓花蕾，发育时期为单核靠边期(横径4-6mm)，在冰箱里4℃冷处理72h，然后将花蕾分别用70％酒精和0.1％升汞消毒，将消毒好的花蕾用无菌吸水纸吸干表面的水后剥取花药，接种到愈伤组织诱导培养基中，然后转到再生培养基中，再将诱导出的草莓健壮苗转接到继代培养基上，最后转到生根培养基进行生根处理；

(2)超低温处理脱毒：利用结合内标的RT-PCR进行草莓轻型黄边病毒(SMYEV)的检测，对含有该病毒的植株，拨取茎尖做初代培养，继代扩繁5次以后，拨取2mm左右的茎尖，利用玻璃化超低温液氮处理技术对SMYEV进行脱除，在病毒脱除过程中，预培养蔗糖浓度为0.5mol/L，处理3d；装载处理为25℃，1h；玻璃化处理为0℃，2h；液氮处理1h后，进行40℃水浴2min，草莓茎尖的存活率为76％，轻型黄边病毒的脱毒率达到95％。