[发明专利]一种检测猪细小病毒的双抗体夹心ELISA方法无效
| 申请号: | 201010248076.8 | 申请日: | 2010-08-06 |
| 公开(公告)号: | CN101893633A | 公开(公告)日: | 2010-11-24 |
| 发明(设计)人: | 高崧;彭大新;杨鸿婷 | 申请(专利权)人: | 扬州大学 |
| 主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577 |
| 代理公司: | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人: | 卢亚丽 |
| 地址: | 225009 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 检测 细小 病毒 抗体 夹心 elisa 方法 | ||
1.一种双抗体夹心ELISA检测猪细小病毒的方法,其特征在于,是兔抗猪细小病毒IgG作为一抗包板,鼠抗猪细小病毒单克隆抗体用辣根过氧化物酶标记后作为二抗,夹心法检测猪细小病毒病毒抗原。
2.根据权利要求1所述的双抗体夹心ELISA检测猪细小病毒的方法,其特征在于,兔抗猪细小病毒IgG稀释倍数为1∶12800,酶标单抗的最佳稀释倍数为1∶16,用pH 9.6碳酸盐缓冲液做为包被缓冲液,37℃包被1.5h,含8%犊牛血清的PBST为封闭剂,37℃封闭2h;样品37℃作用1.5h,用含4%犊牛血清的PBST稀释的酶标单抗,37℃作用1h,TMB做为显色剂,37℃避光显色10min;用PBST做为洗涤剂,每次5min。
3.根据权利要求1所述的双抗体夹心ELISA检测猪细小病毒的方法,其特征在于,检测结果的判定标准为A450≥0.445时结果判为阳性。
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