[发明专利]一株副干酪乳杆菌及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，涉及一株副干酪乳杆菌及其应用方法。 

背景技术

国际营养学界给“益生菌”的定义是：指一类有益人类健康的肠道生理细菌，还常被描述为“良性”或“健康”的细菌。它包括保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、双岐杆菌、嗜酸乳杆菌、唾液乳杆菌、发酵乳杆菌等细菌。应用于人体的益生菌产品有益生菌发酵的乳制品、肉制品、果蔬制品等，医药保健行业。乳酸菌是益生菌中的主要一类，具有抗肿瘤、缓解乳糖不耐症、增强免疫力、降低胆固醇、调整肠道菌群等生理作用。乳酸菌主要用于发酵肉制品、发酵水产品等发酵食品的生产中，抑制了腐败菌和致病菌的生长及毒素的产生，使发酵食品的保存期大大延长，有利于储藏和流通，食用安全性更好，营养成分更丰富。 

微囊藻毒素(MCs)是由富营养化水体中的铜绿微囊藻、水华鱼腥藻、念珠藻等蓝藻产生的一种环状七肽物质。微囊藻毒素以动物肝脏为作用靶器官，能够特异性地抑制蛋白磷酸酶活性从而诱发癌症等一系列病变。由于毒性强、在食物链中波及范围广以及具有鲜明的地域特征，微囊藻毒素日益成为危害人类健康的重要杀手。目前，干预MCs的手段可分为物理防治、化学防治以及生物防治。其中，微生物处理法中部分益生菌对MCs的干预作用因其安全性(GRAS)而成为真正能够实现在清除MCs过程中与水源、食品“零距离”接触的生物防治剂。同时，由于益生菌定殖人体肠道后在抑制有害微生物生长、提高人体免疫力、协助消化和营养吸收等诸多方面发挥的长期功效，使得益生菌作为体内MCs“清道夫”的价值更加突出。 

发明内容

本发明提供了一株副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei BBE10-215)。 

本发明所提供的副干酪乳杆菌BBE10-215 (Lactobacillus paracasei)，已于2010年7月7日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏单位地址为中国武汉，武汉大学，保藏编号为CCTCC NO：M 2010169，分类学命名为副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)；其16SrDNA如核苷酸序列表中SEQ ID NO:1所示，以其16SrDNA全序列为基础的系统发育树如说明书附图1所示。 

本发明提供了一种所述副干酪乳杆菌的应用，是将培养好的副干酪乳杆菌用于微囊藻毒素的清除。将培养好的副干酪乳杆菌调整菌浓的比例至适宜范围，接种至藻毒素溶液中，室 温下静止培养或不定时搅拌使溶液混合均匀。 

所述干酪乳杆菌为从泡菜、腊肠等传统发酵食品中筛选，其保藏条件如下：从生长良好的平板上取2-3环益生菌移入MRS培养基中，37℃静置培养20h，取0.7mL移入盛有0.3mL无菌甘油的甘油管中，放-70℃冰箱保存。 

所述MRS培养基为：葡萄糖20g L^-1，蛋白胨10g L^-1，牛肉膏10g L^-1，酵母浸出汁5gL^-1，无水乙酸钠5g L^-1，磷酸二氢钾2gL^-1，柠檬酸三铵2g L^-1，MgSO₄·7H₂O 0.2g L^-1，MnSO₄·H₂O 0.05g L^-1，Tween-80 1mL L^-1，pH 5.5。 

所述干酪乳杆菌培养条件为：将甘油管保藏的益生菌接入MRS液体培养基，在37℃静置培养20h至对数中后期，以2％接种量取-70℃甘油贮存液接种于MRS培养基中，37℃静置培养20h。 

在藻毒素浓度为1000μg L^-1的条件下，10⁹CFU mL^-1的菌体与之共培养24h后，降解率高达到12％(图2)。在藻毒素浓度为100μg L^-1的条件下，菌浓为10⁹CFU mL^-1的菌体与之共培养24h后，降解率最高达到76％。在藻毒素起始浓度为500μg L^-1的条件下，菌浓为10⁹CFUmL^-1的菌体与之共培养24h后，降解率最高达到39％。 

微囊藻毒素的检测采用高效液相的方法：