[发明专利]一种鉴别猪、牛、羊肉及其制品的方法

权利要求书

1.用于鉴别猪、牛、羊肉及其制品的PCR引物，其核苷酸序列如SEQ ID No.1和2所示。

2.含有如权利要求1所述引物的用于鉴别猪、牛、羊肉及其制品的试剂盒。

3.如权利要求2所述的试剂盒，其还包括扩增缓冲液、DNA聚合酶和dNTPs。

4.一种鉴别猪、牛、羊肉及其制品的方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)提取样品DNA；

2)以样品DNA为扩增模板，用权利要求1所述引物进行PCR扩增；

3)然后经重量体积分数为1.5％的琼脂糖凝胶电泳，电压为150～300V；电泳结束后，将凝胶置于EB染缸，20min后在紫外光照射下成像。

5.如权利要求4所述的鉴别方法，其特征在于，步骤2)中的PCR反应程序为：95℃5min、94℃30s、50℃30s、72℃30s，进行35个循环；72℃7min。

6.如权利要求4或5的鉴别方法，其特征在于，步骤1)的具体步骤如下：用剪子将肉样剪碎后在研钵中研磨，取0.1g样品放入2mL的离心管中，加入1mL CTAB提取液和20μL20mg/mL蛋白酶K水溶液，充分震荡，65℃水浴0.5～1h，不时震荡；降至室温后以12000g离心15min；取上清液转移至新离心管中，加入等体积的酚和氯仿/异戊醇混合溶剂，氯仿与异戊醇的体积比为24∶1，充分震荡后，以12000g离心10min；取上清液并转移至新离心管中，加入等体积的氯仿/异戊醇混合溶剂，氯仿与异戊醇的体积比为24∶1，充分震荡后，以12000g离心10min；取上清液并转移至新离心管中，加入0.1倍体积的3mol/L NaAc和2/3倍体积的异丙醇，离心管放入-20℃静置2h以上；然后以12000g离心15min，倒去液体部分留下沉淀，用70％乙醇洗涤并在空气中干燥沉淀，然后用100μL无菌水溶解。