[发明专利]利用家蚕生物反应器生产猪圆环病毒2型重组衣壳蛋白亚单位疫苗的方法及其产品

权利要求书

1.一种利用家蚕生物反应器生产猪圆环病毒2型重组衣壳蛋白亚单位疫苗的方法，其特征在于，包括以下步骤：

A克隆猪圆环病毒2型衣壳蛋白的ORF2基因，与杆状病毒转移载体连接，获得重组转移载体；

B重组转移载体与杆状病毒共同转染昆虫细胞，培养物上清经噬斑筛选，获得重组杆状病毒；

C重组杆状病毒感染家蚕幼虫或蚕蛹，在家蚕幼虫或蚕蛹中表达重组猪圆环病毒2型衣壳蛋白；

D回收重组病毒感染的家蚕幼虫或蚕蛹的血淋巴；

E分离纯化血淋巴中的重组猪圆环病毒2型衣壳蛋白；

F利用纯化的重组猪圆环病毒2型衣壳蛋白，辅以佐剂，制备猪圆环病毒2型亚单位疫苗。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤A中猪圆环病毒2型衣壳蛋白的ORF2基因序列包含序列表中的SEQ IDNO1。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤B中所述重组杆状病毒中猪圆环病毒2型ORF2基因的表达受多角体启动子的控制。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤B中所述昆虫细胞包括家蚕卵巢细胞。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤B中所述的杆状病毒包括家蚕核型多角体病毒。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤C中所述的家蚕品种包括箐松×皓月或与之相一致的家蚕品种。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤E中所述的重组猪圆环病毒2型衣壳蛋白序列包含序列表中的SEQ ID NO2。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤E中所述的重组猪圆环病毒2型衣壳蛋白为如下三种多肽的任意一种：

i)含有序列表中的SEQ ID NO2序列的多肽；

ii)与i)所述多肽至少80％同源的多肽；

iii)i)和ii)所述多肽的免疫原性部分。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤F中所述的佐剂为水性佐剂或油性佐剂。

10.根据权利要求1～8任意一项方法生产的重组猪圆环病毒2型衣壳蛋白。

11.根据权利要求1～9任意一项方法生产的猪圆环病毒2型重组衣壳蛋白亚单位疫苗。

12.根据权利要求11所述疫苗，其特征在于，所述疫苗每头份包含至少0.5微克重组猪圆环病毒2型衣壳蛋白。