[发明专利]一种产乳酸工程菌及其构建方法和应用

权利要求书

1.一种产乳酸工程菌，其特征在于基因组中携带外源乳酸脱氢酶(LDH)基因且沉默了丙酮酸脱羧酶(PDC1)基因。

2.权利要求1所述产乳酸工程菌的构建方法，其特征在于包括如下步骤：

1)克隆Bovine的LDH基因；

2)克降PDC1基因的上下游序列；

3)融合PCR构建两端为PDC1基因的上下游序列，中间为LDH基因的同源重组片段；

4)将步骤3)得到的同源重组片段导入受体菌；

5)验证所述工程菌。

3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于步骤4)中所述受体菌为酵母菌。

4.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于所述酵母菌为低产乳酸、高产乙醇的酿酒酵母。

5.权利要求1所述产乳酸工程菌在发酵生产乳酸中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于发酵生产的工艺为：30℃、200r/min摇瓶培养所述工程菌至对数中期，以8％接种量接种入发酵罐，发酵培养100小时；发酵参数为：pH5.5，通气量1.5L/min，溶氧50％。