[发明专利]一种从鹅血中分离免疫球蛋白IgY(ΔFc)的方法

权利要求书

1.一种从鹅血中分离免疫球蛋白IgY(ΔFc)的方法，其特征在于包括如下步骤：

1)配置0.1M的柠檬酸钠溶液作为抗凝剂，将新鲜鹅血与抗凝剂按照体积比为9∶1的比例混合均匀，用离心机以2500～3000rpm转速离心10～20分钟，得到血浆，4～8℃静置5～12小时，吸除上层聚集的脂肪，加入二氧化硅粉末进一步脱脂，二氧化硅粉末的加入量为300～1000mg/ml血浆，室温搅拌30～60分钟，过滤，得到脱脂血浆；

2)将脱脂血浆与浓度为60mM的乙酸-乙酸钠缓冲液(pH4～5)按照体积比为1～4混合均匀，得到稀释血浆，加入辛酸，辛酸加入量为30～100μl/ml稀释血浆，4～8℃静置2～4小时，用离心机以8000-10000rpm转速离心20～30分钟，取上清液，得到免疫球蛋白IgY(ΔFc)粗品溶液；

3)调节免疫球蛋白IgY(ΔFc)粗品溶液的pH至5～7，用0.45μm滤膜过滤后，上样到填充有混合模式吸附剂的层析柱中，平衡缓冲液冲洗，洗脱缓冲液洗脱，收集洗脱峰对应的洗脱缓冲液，得到免疫球蛋白IgY(ΔFc)溶液；

4)将免疫球蛋白IgY(ΔFc)溶液脱盐，冷冻干燥，得到纯度＞95％的免疫球蛋白IgY(ΔFc)固体产品。

2.根据权利要求1所述的一种从鹅血中分离免疫球蛋白IgY(ΔFc)的方法，其特征在于所述的混合模式吸附剂为MEP Hypercel，或者以4-巯乙基吡啶或2-巯甲基咪唑为功能配基的层析介质。

3.根据权利要求1所述的一种从鹅血中分离免疫球蛋白IgY(ΔFc)的方法，其特征在于所述的平衡缓冲液为磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液，pH值为5～7。

4.根据权利要求1所述的一种从鹅血中分离免疫球蛋白IgY(ΔFc)的方法，其特征在于所述的洗脱缓冲液为柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液，pH值为3～4.5。