[发明专利]一种用于体外测定大豆分离蛋白消化率的方法

说明书

技术领域

本发明涉及食品加工技术，更具体地涉及用于体外测定大豆分离蛋白消化率的方法。

背景技术

大豆分离蛋白是以低温脱溶大豆粕为原料生产的一种全价蛋白类食品。蛋白质含量在90％以上，氨基酸种类有近20种，并含有人体必需氨基酸。其营养丰富，不含胆固醇，近年的研究证实，大豆蛋白具有肉类蛋白所不具有的保健价值，是植物蛋白中为数不多的可替代动物蛋白的品种之一，对维系人类生命和保证人们的健康起着重要作用。但大豆蛋白分子结构紧密，对酶解具有很强的抵抗力，不利于人体内的消化和吸收，其生理活性和消化性是开发大豆蛋白加工技术的主要难题。因此，测定蛋白在人体内的消化率对提高和改善大豆蛋白加工难题具有重要的现实意义。

目前对蛋白质消化的研究方法主要有化学法分析、体内消化法(人体及动物实验法)和体外模拟法等。化学分析法快速简便，但这种利用概略养分分析所测得的蛋白养分与人体消化吸收养分间存在很大差异，不足以准确地反映出蛋白的实际营养价值。体内消化法(人体及动物实验法)是测定蛋白质消化最好的方法，但是这种方法复杂、时间长、费用高；且由于很多因素影响而很难做到。与前两种方法相比，体外模拟法具有快速、简便、重复性好等优点，虽体内消化过程难以精确再现，但是，存在于体内的条件是可以在体外再现的。通过对体内真实情况的模拟，能很好的反映食物在体内消化吸收，可在短时间内对多个样品进行评定。

现有技术文献中已有关于对大豆蛋白进行体外消化率测定的记载。例如，黄沧海等(几种蛋白质原料体外消化率测定方法的比较，饲料工业，高压物理学报，2005年第26卷第20期)分别采用胃蛋白酶-胰蛋白酶两步法、肉食性鱼类(如鲈鱼)消化道粗酶提取液消化法和草食性鱼类(如草鱼)消化道粗酶提取液消化法测定了酪蛋白、鱼粉、豆粕、菜籽粕、酵母粉和玉米蛋白粉等7种蛋白原料的消化率。结果表明，胃蛋白酶-胰蛋白酶两步法在测定鱼粉蛋白质消化率时可以替代鱼类消化液粗酶消化法，对于其它蛋白质原料使用该方法应慎重。Pedersen，B.和Eggum，B.O.(Prediction ofprotein digestibility by an in vitro enzymatic pH-stat procedure，1983年第49期)用体外法测定了61种食物蛋白质的消化率，其中57种植物蛋白或植物蛋白与动物蛋白的混合物，体外实验测的消化率与体内实验(大鼠试验)有很好的相关性。李清晓等(豆粕粉碎粒度与蛋白质体外消化率的关系研究，家畜生态学报，2005年第26卷第5期)采用胃蛋白酶一胰酶两步法，通过体外模拟鸡体消化道内环境来比较不同粉碎粒度豆粕的蛋白消化率，从而确定适合肉仔鸡生长的较适宜豆粕粉碎粒度。

蛋白质在体内的消化是一个两步过程，第一步是蛋白质与预可消化性的胃蛋白酶相接触，第二步是蛋白质和氨基酸与胰蛋白酶的接触消化。目前，胃蛋白酶-胰酶两步体外消化法是公认的一种较好的测定蛋白质消化率的方法。但该方法大多用于饲料的消化率测定，虽有关于大豆蛋白体外消化的研究，但这些研究中所采用的蛋白酶没有经过酶的标准化，在体外消化中酶的活性变化范围可能会较大，且对体内条件的模拟及仿真度不高。这样，会使体内消化率的测定结果不稳定且无对比参考性。因此，还需要对现有的大豆蛋白体外消化法进行改进以提高其测定结果的稳定性和对比参考性。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明所要解决的技术问题在于提供一种用于体外测定大豆分离蛋白消化率的方法。

本发明在于提供一种大豆分离蛋白体外消化率的测定方法，该方法是在现有技术基础上加以改进，可提高测定结果的稳定性。

根据本发明，所述用于体外测定大豆分离蛋白消化率的方法包括下列步骤：

配制大豆分离蛋白的水溶液(0.01～0.1％，g/100mL)，作为样品；

使用一种或多种酶模仿人胃肠道的环境对所述样品进行体外消化；

终止消化过程，获得待测样品；以及

测定所述待测样品的体外消化率。

在一个较佳实施方式中，在配制大豆分离蛋白的水溶液之前，可首先对所述大豆分离蛋白进行标准化检测。

在一个较佳实施方式中，所述大豆分离蛋白的蛋白质含量优选在90％(干基)以上。

在一个较佳实施方式中，所述水优选为双蒸水。

在一个较佳实施方式中，所述酶可选自胃蛋白酶、胰酶、胰蛋白酶、以及胰凝乳蛋白酶。

在一个较佳实施方式中，消化所述样品的过程可包括以下步骤：

调节所述样品的pH到大约1.5；

加入胃蛋白酶；