[发明专利]诱导干细胞向胰岛样细胞分化的方法

权利要求书

1.诱导干细胞向胰岛样细胞分化的方法，其特征在于利用干细胞具有多向分化的潜能，诱导其向胰岛样细胞分化，诱导分化的细胞可分泌胰岛素，为胰岛细胞移植、微囊化干细胞制剂的制备提供种子细胞，同时诱导分化的细胞可作为体外的药代动力学模型用于细胞药物筛选。

2.按照权利要求1所述的诱导方法，其特征在于利用载体下调NRSF在干细胞中的表达水平，并同时添加营养素或细胞因子，分两个阶段诱导干细胞向胰岛样细胞分化。

3.按照权利要求1所述的诱导方法，其特征在于，所述的干细胞具有多向分化潜能，包括人和哺乳动物羊水、胚胎、骨髓、动员的外周血、脐带血以及其它组织来源的间充质干细胞、胰腺干细胞、肝干细胞、造血干细胞及神经干细胞。

4.按照权利要求1所述的诱导方法，其特征在于，所述的载体包括慢病毒载体，腺病毒载体，腺相关病毒载体，逆转录病毒载体，通过这些载体介导下调NRSF在干细胞中表达。

5.按照权利要求1或4所述的诱导方法，其特征在于，所述的载体中慢病毒载体是转染NRSF基因的首选病毒载体。

6.按照权利要求1所述的诱导方法，其特征在于，培养液中添加了营养素或细胞因子，包括Activin-A，bFGF，B27，BTC，nicotinamide，可以诱导转染NRSF干涉载体的干细胞向胰岛样细胞分化。

7.按照权利要求1所述的诱导方法，其特征在于获得的胰岛样细胞团能表达胰岛相关基因及蛋白，包括葡萄糖转运子、葡萄糖激酶、胰岛素、胰高血糖素、生长抑素。

8.体外诱导干细胞向胰岛样细胞分化后的胰岛样细胞的用途，其特征在于诱导分化后的细胞可分泌胰岛素，可作为种子细胞用于胰岛细胞移植、微囊化干细胞制剂的制备。

9.按照权利要求8所述的用途，其特征在于诱导分化后的细胞可作为体外的药代动力学模型用于细胞药物筛选。