[发明专利]检测试剂盒及其应用方法

说明书

技术领域

本发明涉及免疫检测领域的一种快速检测试剂盒及其应用方法，尤其涉及一种通过显色来判断检测结果的检测试剂盒及其应用方法。

背景技术

快速检测试剂盒主要应用免疫层析技术，免疫层析技术是二十世纪九十年代出现的一种基于免疫胶体金技术的快速诊断技术。其原理是将特异的蛋白(抗原或者抗体)先固定于硝酸纤维膜的某一区域，当该干燥的硝酸纤维素膜一端浸入样品后，由于毛细管作用，样品将沿着该膜向前移动，当移动至该区域时，样品中相应的抗原即与该抗体发生特异性结合。若用免疫胶体金标记技术可使该区域显示一定的颜色，从而实现特异性的免疫诊断。

部分检测项目(比如促黄体生成激素、铁蛋白等)应用目前的检测试剂盒进行检测时，需要将检测线的显色强度与标准显色强度对比，或者对比检测线和质控线的显色强度。由于人为地比较显色强度(尤其是在显色强度比较接近时)存在误差，因此使得试验结果的可靠性也较小。

目前需要一种通过是否显色来比较样品中的待测物的浓度与检测限度的试剂盒，从而减少结果判断的主观依赖性。

发明内容

针对现有技术的缺点，本发明的目的是提供一种通过显色来判断检测结果的检测试剂盒及其应用方法。

本发明的所采用的具体技术方案如下。

本发明的检测试剂盒包括样品垫、结合物垫、硝酸纤维素膜、吸水滤纸、反应支持物，所述样品垫、结合物垫、硝酸纤维素膜、吸水滤纸依次连接并均设置在所述反应支持物上，所述结合物垫含有示踪物标记的生物活性原料A，所述硝酸纤维素膜设置有检测条带和质控条带，所述检测条带设置于靠近所述结合物垫的一侧并含有生物活性原料B，所述质控条带设置于远离结合物垫的一侧并含有生物活性原料C，所述检测试剂盒还包括设置在所述样品垫上并与所述样品垫连通的样品处理单元，所述样品处理单元包括能够过滤样品的样品处理垫和吸附有生物活性原料D的渗透滤膜，所述生物活性原料D能够吸附所述样品中的待测物。

优选地，所述生物活性原料A、B、C、D是抗原或抗体，其中，所述生物活性原料A、B、D相似或不同，所述生物活性原料C不同于所述生物活性原料A、B、D。

优选地，所述检测试剂盒还包括固定卡，所述样品垫、结合物垫、硝酸纤维素膜、吸水滤纸、反应支持物、样品处理单元通过所述固定卡固定连接在一起。

优选地，所述检测试剂盒还包括固定在所述固定卡中的稀释液孔，所述稀释液孔与所述样品垫连通、设置在所述样品处理单元的远离所述结合物垫的一侧并且与所述样品处理单元连接。

优选地，所述样品处理垫由纤维素制成，所述渗透滤膜由硝酸纤维素或醋酸纤维素制成。

本发明还提供一种应用上述权利要求的检测试剂盒的生物制品检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)样品通过所述样品处理单元，样品中的部分待测物与所述生物活性原料D反应并停留在所述渗透滤膜上；

(2)样品经过所述样品垫后移动至所述结合物垫，未与生物活性原料D反应的待测物与所述示踪物标记的生物活性原料A结合，形成复合物；

(3)所述复合物在经过所述硝酸纤维素膜的过程中依次与相对于所述复合物不足量的生物活性原料B和生物活性原料C特异性结合；

(4)如果所述检测条带出现红色或粉红色，则表明所述待测物含量在检测限度以上，为阳性，如果所述检测条带未出现红色或粉红色，则表明所述待测物含量在检测限度以下，为阴性；

(5)如果所述质控条带出现红色或粉红色，则表明步骤(4)的实验结果有效，如果所述质控条带未出现红色或粉红色，则表明所述示踪物失效或者实验操作有误，步骤(4)的实验结果无效。

优选地，在所述步骤(1)中，如果所述待测物在所述样品中的浓度或阈值偏高，则在样品进入所述样品处理单元后，通过所述稀释液孔加入稀释液。

优选地，根据所述样品中待测物的性质相应地选择渗透滤膜的厚度、层数以及处理所述渗透滤膜的参数，所述参数包括生物活性原料的种类及浓度、封闭方法。

优选地，所述选择的方法为正交试验设计。

本发明的有益效果如下。

样品的待测物浓度通过样品处理单元的处理后可以降低一个水平，通过控制该水平的具体值，可以达到更敏感地待测物浓度是否在某个水平之上。

通过本发明的方法以及试剂盒，能够改进目前很多检测，尤其是促卵泡生成激素、铁蛋白等需要比色确定其浓度的检测项目以及目标浓度和正常浓度相差不大的检测项目。本发明使这些检测项目改进成为只需要判断是否出现有色检测条带即可判断。