[发明专利]检测百日咳杆菌的引物组、检测试剂盒以及检测方法无效
申请号: | 201010218122.X | 申请日: | 2010-07-02 |
公开(公告)号: | CN101875974A | 公开(公告)日: | 2010-11-03 |
发明(设计)人: | 王和平;马卓娅;邓继岿;郑跃杰 | 申请(专利权)人: | 深圳市儿童医院 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11 |
代理公司: | 深圳市科吉华烽知识产权事务所 44248 | 代理人: | 胡吉科 |
地址: | 518026 广东省深*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 百日咳杆菌 引物 试剂盒 以及 方法 | ||
1.检测百日咳杆菌的引物组,其特征是:包括IS481基因扩增对,引物对序列为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列;和/或PT基因扩增引物对,引物对序列为SEQ ID NO:3和SEQID NO:4所示的核苷酸序列。
2.检测百日咳杆菌的引物组,其特征是:对权利要求1所述的IS481基因扩增引物对,和/或PT基因扩增引物对任意一个或者几个碱基进行突变得到的引物组。
3.包括权利要求1或者2所述的百日咳杆菌的引物组的检测试剂盒。
4.如权利要求3所述的百日咳杆菌的引物组的检测试剂盒,其特征是:所述试剂盒包括:
权利要求1或者2所述的引物组;
缓冲液;
dNTP;
MgCl2;
Taq酶;
阴性对照;
阳性对照;
高压双蒸水。
5.一种百日咳杆菌的检测方法,所述方法为通过权利要求1或者2所述的百日咳杆菌的引物组进行PCR扩增待检测样品获得核酸检测样品。
6.如权利要求5所述的百日咳杆菌的检测方法,其特征是:所述的PCR扩增为包括IS481基因扩增引物对和PT基因扩增引物对的双重PCR扩增。
7.如权利要求6所述的百日咳杆菌的检测方法,其特征是:所述的PCR扩增步骤为:
(1)配制PCR反应体系,扩增模板最后加入反应体系中;
(2)PCR扩增条件为:95℃预变性5min,95℃15s,60℃15s,72℃15s,30个循环,72℃延伸5min;
(3)凝胶电泳检测扩增产物。
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