[发明专利]HPV6型L2N120E7E6融合蛋白基因、表达载体、方法、菌株和用途有效
| 申请号: | 201010212177.X | 申请日: | 2010-06-21 |
| 公开(公告)号: | CN102286104A | 公开(公告)日: | 2011-12-21 |
| 发明(设计)人: | 田厚文;赵莉;任皎;庞正;冯靖;张忠献;阮力;谭文杰 | 申请(专利权)人: | 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 |
| 主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/63;C12N15/70;C12N1/21;A61K39/12;A61K48/00;A61P15/00;A61P31/20;C12R1/19 |
| 代理公司: | 北京泛华伟业知识产权代理有限公司 11280 | 代理人: | 刘丹妮 |
| 地址: | 100052 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | hpv6 l2n120e7e6 融合 蛋白 基因 表达 载体 方法 菌株 用途 | ||
1.一种人乳头瘤病毒(HPV)6型L2N120E7E6融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白的氨基酸序列为SQE.ID.NO.1所示的序列。
2.一种用于编码权利要求1所述融合蛋白的DNA序列,其特征在于,所述DNA序列的核苷酸序列为SQE.ID.NO.2所示的序列。
3.一种用于表达权利要求1所述融合蛋白的表达载体,其特征在于,所述表达载体含有权利要求2所述的DNA序列;
优选地,所述表达载体为原核或真核表达载体;
更优选地,所述表达载体为大肠杆菌质粒载体。
4.根据权利要求3所述的表达载体,其特征在于,所述大肠杆菌质粒载体是由权利要求2所述的DNA序列插入至质粒pQE30的BamHⅠ位点间来构建的;
优选地,所述大肠杆菌选自JM109和M15。
5.一种用于生产权利要求1所述融合蛋白的菌株,其特征在于,所述菌株含有权利要求3或4所述的表达载体;
优选地,所述菌株为大肠杆菌;
更优选地,所述大肠杆菌选自JM109和M15。
6.一种制备权利要求1所述融合蛋白的方法,其特征在于,所述方法包括构建含有权利要求2所述DNA序列的表达载体,并使该表达载体得到表达;
优选地,所述表达载体为大肠杆菌质粒载体;
更优选地,所述大肠杆菌选自JM109和M15。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:
1)将权利要求2所述的DNA序列插入至质粒pQE30的BamHⅠ位点,构建出重组表达质粒pQE30-HPV6L2N120E7E6;
2)用步骤1)所构建的重组表达质粒转化大肠杆菌,获得含有该重组表达质粒的菌株,接种培养,IPTG诱导表达;
3)将步骤2)所得到的大肠杆菌离心裂解后,收获包涵体,用8M尿素悬起,离心,取上清用镍离子亲和层析柱纯化表达蛋白。
8.一种制备用于预防和治疗人乳头瘤病毒(HPV)6型感染及相关疾病(如生殖器疣)药物的方法,其特征在于,该方法包括将权利要求2所述的DNA序列、权利要求3或4所述的表达载体、权利要求5所述的菌株用于表达权利要求1所述的人乳头瘤病毒(HPV)6型L2N120E7E6融合蛋白。
9.权利要求1所述的融合蛋白、权利要求2所述的DNA序列、权利要求3或4所述的表达载体、权利要求5所述的菌株在制备用于预防和治疗人乳头瘤病毒(HPV)6型感染及相关疾病(如生殖器疣)药物中的应用;
优选地,所述药物为疫苗。
10.一种用于预防和治疗生殖器疣的疫苗,其特征在于,所述疫苗包括权利要求1所述的融合蛋白、权利要求2所述的DNA序列、权利要求3或4所述的表达载体、或权利要求5所述的菌株。
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