[发明专利]一种生物合成共轭亚油酸CLA的方法

权利要求书

1.一种合成脂肪酸的方法，为培养重组细胞，获得脂肪酸；

所述重组细胞为将SCD1的编码基因导入宿主细胞得到的重组细胞，所述SCD1为下述1)或2)的蛋白质：

1)由序列表中的序列2所示的蛋白质，

2)将序列表中的序列2氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能由1)衍生的蛋白质。

2.根据权利要求1的方法，其特征在于：所述培养的方法如下：

1)将所述重组细胞在不含反式十八碳烯酸的培养基中培养(10-14)小时，优选为10小时、12小时或14小时，

2)再在含有反式十八碳烯酸的培养基中继续培养(45-50)小时获得脂肪酸；所述培养优选为培养45、48或50小时。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述步骤1)和步骤2)的培养条件均为：培养温度为37℃，CO₂的含量为5％。

4.根据权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：所述SCD1的编码基因为如下1)或2)中任一所述的DNA分子：

1)序列表中的序列1所示的DNA分子；

2)与1)限定的DNA序列至少具有70％、至少具有75％、至少具有80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性具有相同功能的DNA分子。

5.根据权利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于：所述SCD1的编码基因是通过重组表达载体导入宿主细胞。

6.根据权利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于：所述宿主细胞为真核细胞，所述真核细胞优选为HEK 293细胞。

7.根据权利要求1-6中任一所述的方法，其特征在于：所述重组载体为将SCD1的编码基因插入出发载体的EcoRI识别位点构建的重组载体，所述出发载体优选为pCAGGS。

8.根据权利要求1-7中任一所述的方法，其特征在于：所述脂肪酸为共轭亚油酸CLA和n-7脂肪酸家族；所述共轭亚油酸优选为顺式-9，反式-11异构体c9t11-CLA和/或反式-10，顺式-12异构体t10c12-CLA；所述n-7脂肪酸家族优选为棕榈油酸16:1n-7和/或顺式十八碳烯酸18:1n-7。

9.权利要求1-8所述方法在提高细胞内脂肪酸含量的应用，所述脂肪酸优选为共轭亚油酸CLA和n-7脂肪酸家族；所述共轭亚油酸尤其优选为顺式-9，反式-11异构体c9t11-CLA和/或反式-10，顺式-12异构体t10c12-CLA；所述n-7脂肪酸家族尤其优选为棕榈油酸16:1n-7和/或顺式十八碳烯酸18:1n-7。

10.一种重组细胞，为将SCD1的编码基因导入宿主细胞得到的重组细胞，所述SCD1为下述1)或2)的蛋白质：

1)由序列表中的序列2所示的蛋白质，

2)将序列表中的序列2氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能由1)衍生的蛋白质；

所述SCD1的编码基因为如下1)或2)中任一所述的DNA分子：

1)序列表中的序列1所示的DNA分子；

2)与1)限定的DNA序列至少具有70％、至少具有75％、至少具有80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性具有相同功能的DNA分子；

所述宿主细胞为真核细胞，所述真核细胞优选为HEK 293细胞。