[发明专利]一种共固定化细胞因子及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种共固定化细胞因子，其特征在于包括聚氨酯和偶联在聚氨酯上的细胞因子，所述细胞因子为TNF-α和IFN-γ。

2.根据权利要求1所述的共固定化细胞因子，其特征在于所述聚氨酯为聚酯型聚氨酯或聚醚性聚氨酯。

3.权利要求1或2所述共固定化细胞因子的制备方法，其特征在于包括如下步骤：(1)将摩尔比为1～10∶10～1的TNF-α和IFN-γ分别加入含N-琥珀亚酰胺的二甲基酰胺/PBS溶液中，冰浴条件下搅拌反应，反应完毕后分别离心，得到光活性TNF-α和IFN-γ，冷冻干燥；(2)以培养板孔径为标准，在聚氨酯薄膜上裁剪出圆形小膜，经消毒后贴附于培养板孔内，将光活性TNF-α和IFN-γ混合加到培养板内聚氨酯薄膜上，避光干燥，经光固定化后，用PBS洗板，培养板孔内即为共固定化细胞因子。

4.根据权利要求3所述共固定化细胞因子的制备方法，其特征在于步骤(1)中所述TNF-α和IFN-γ的摩尔比为1∶1。

5.根据权利要求3所述共固定化细胞因子的制备方法，其特征在于步骤(1)中所述二甲基酰胺/PBS溶液的pH为7.4，二甲基酰胺和PBS的体积比为4∶1，所述N-琥珀亚酰胺与TNF-α和IFN-γ的摩尔比为10∶1以上。

6.根据权利要求3所述共固定化细胞因子的制备方法，其特征在于步骤(1)中所述冰浴温度为0～10℃，搅拌时间为24～96h。

7.根据权利要求3所述共固定化细胞因子的制备方法，其特征在于步骤(2)中所述光活性TNF-α和IFN-γ的总量为20ng/cm²。

8.根据权利要求3所述共固定化细胞因子的制备方法，其特征在于步骤(2)中所述光固定化是用15～120W紫外灯在2～15cm距离处照射10s～30min。

9.根据权利要求3所述共固定化细胞因子的制备方法，其特征在于步骤(2)中所述用PBS反复洗板的次数为20次以上。

10.权利要求1或2所述共固定化洗板因子在制备预防或治疗宫颈癌的药物中的应用。