[发明专利]1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯对照品的制备方法

权利要求书

1.一种4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯对照品的制备方法，包括以下步骤：

(1)将白及药材粉碎成粗粉，按照白及粗粉∶溶剂＝1∶4～20(重量)的比例，回流提取1～8小时，滤液回收溶剂，得到流浸膏，其中所述溶剂为甲醇或乙醇，浓度为30～80％；

(2)将上述白及流浸膏加水稀释，白及流浸膏∶水＝1∶4～10(重量)，稀释液经大孔吸附树脂柱富集，以20～80％乙醇为解吸附剂进行洗脱，收集洗脱液，回收溶剂，得到浓缩液，加硅胶混合均匀，硅胶加入量按白及粗粉∶硅胶＝1∶0.02～0.1(重量)计，室温干燥，得到干燥粉末；

(3)将上述干燥粉末转入层析柱，依次以不同比例氯仿-甲醇为洗脱剂进行洗脱，氯仿∶甲醇＝1∶0～0.2、1∶0.2～0.4、1∶0.5～0.9(体积)，依次收集洗脱液，薄层层析检识，合并1，4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯组分，回收溶剂，得到1，4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯粗品；

(4)将上述1，4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯粗品进行凝胶柱层析，甲醇或水为洗脱剂进行洗脱，收集洗脱液，薄层层析检识，合并1，4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯组分，回收溶剂，得到1，4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯精品；

(5)将上述1，4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯精品进行反相硅胶柱层析，以甲醇-水洗脱，甲醇占水的30～70％(体积)，收集洗脱液，经高效液相检测，将纯度≥98％的1，4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯组分合并，回收溶剂，得到1，4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯对照品。

2.根据权利要求1的方法，其特征在于步骤(1)中所述白及药材选自兰科植物白及Bletilla striata(Thunb.)Reichb.f.的干燥块茎。

3.根据权利要求1的方法，其特征在于步骤(2)中所述大孔吸附树脂为非极性或弱极性大孔吸附树脂。

4.根据权利要求3的方法，其特征在于所述大孔吸附树脂型号为D101或AB-8型大孔吸附树脂。

5.根据权利要求1的方法，其特征在于步骤(3)和步骤(4)中薄层层析的显色条件为10％硫酸乙醇溶液，105℃下加热显色。

6.根据权利要求1的方法，其特征在于步骤(4)中所述凝胶为葡聚糖凝胶或羟丙基葡聚糖凝胶。

7.根据权利要求6的方法，其特征在于所述凝胶型号为Sephadex G-25或Sephadex LH-20型凝胶。

8.根据权利要求1的方法，其特征在于步骤(5)中所述反相硅胶为C8或C18型反相硅胶。

9.根据权利要求1的方法，其特征在于步骤(5)中高效液相检测条件：流动相为24％乙腈-水，检测波长为222nm。