[发明专利]B细胞激活因子拮抗剂及其制备方法与用途

说明书

技术领域

本发明属于基因工程药物领域，具体涉及一种新型B细胞激活因子(BAFF)拮抗剂及其制备方法和用途。

背景技术

自身免疫性疾病，如类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis，RA)、系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)、氏综合症(syndrome，干燥综合症或修格林氏综合症)等都与机体的B细胞或浆细胞过分增殖、体液免疫激活密切相关。

B细胞激活因子(B cell activating factor，BAFF)，又称BLyS，TALL-1，THANK，zTNF4或TNFSF-13B，是1999年发现的TNF家族成员[1]，在B细胞的存活和成熟过程中起重要作用。BAFF为II型跨膜蛋白，以膜结合和可溶两种形式存在，前者由285个氨基酸组成，经蛋白酶水解后，可形成由152个氨基酸组成的可溶性蛋白。在正常生理条件下，可溶性BAFF以三聚体形式存在并具有生物活性。BAFF与另一TNF家族成员APRIL(AProliferaion-inducing Ligand)的蛋白序列具有33％的同源性[2]。BAFF主要由外周血单个核细胞(PBMNC)表达，包括巨噬细胞、单核细胞、树突状细胞[3]。

现已发现BAFF的三个受体：BCMA(B cell maturation antigen)、TACI(transmembraneactivator and CAML interactor)及BAFF-R(BAFF receptor，Br3)均为III型跨膜蛋白。BAFF和APRIL均能够高亲和性地结合TACI和BCMA，但BAFF还能与BAFF-R结合。TNF受体的胞外区含有多个半胱氨酸丰富区(cysteine-rich domain，CRD)，每个CRD由6个半胱氨酸残基形成3个二硫键。BCMA具有单一的CRD，与BCMA相比，TACI含有两个典型的CRD，但N端的CRD不参与配体结合[11]。BAFF-R仅含有1个由4个半胱氨酸残基组成的部分CRD，与BAFF的结合域减少到26个氨基酸，主要介导BAFF-R和BAFF的相互作用[12]。

BAFF除具有促进B细胞存活的作用外，在维持生发中心反应、同型转换、T细胞的活化等方面都具有重要的调节作用。BAFF对T细胞激活的作用，可能在自身免疫疾病的发病机制中起重要作用。因此，BAFF及其受体作为治疗自身免疫疾病的新靶标，受到广泛的关注。BAFF特异的拮抗剂(包括可溶受体TACI-Fc，Br3-Fc或抗BAFF抗体等)能抑制BAFF的生物活性，从而起到治疗类风湿关节炎(RA)、综合症和系统性红斑狼疮(SLE)等自身免疫疾病的作用。目前，对TACI-Fc治疗SLE及RA治疗研究已进入II/III期临床试验，人抗BAFF单克隆抗体LymphoStat-BTM治疗RA和SLE病人的研究也进入III期临床试验，初步结果表明，Lympho Stat-BTM能显著降低外周血成熟B细胞的数目，治疗效果明确。

发明内容

本发明要解决的技术问题是为自身免疫性疾病的防治，尤其是通过拮抗BAFF来防治自身免疫性疾病寻找新的有效选择。

本发明解决技术问题的技术方案是提供一种新型B细胞激活因子拮抗剂。该B细胞激活因子拮抗剂包含有一段结构域，其氨基酸序列为SEQ ID No.1所示。该结构域起主要的B细胞激活因子结合作用。

进一步的，该B细胞激活因子拮抗剂(BAFF Trap)的氨基酸序列为SEQ ID No.1所示。

进一步的，该B细胞激活因子拮抗剂的氨基酸序列为在SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的C-末端还连接有人免疫球蛋白的Fc片段的氨基酸序列。

其中，该B细胞激活因子拮抗剂的氨基酸序列为SEQ ID No.2所示。

进一步的，在该B细胞激活因子拮抗剂其N-末端还连接有信号肽。

其中，该B细胞激活因子拮抗剂的氨基酸序列为SEQ ID No.3所示。

本发明还提供了编码上述的B细胞激活因子拮抗剂的核苷酸序列。

进一步的，该核苷酸序列为SEQ ID No.4所示。

更进一步的，该核苷酸序列为SEQ ID No.5所示。

本发明还提供了含有权利要求6～8任一项所述核苷酸序列的基因载体。

本发明还提供了含有权利要求9所述基因载体的宿主细胞。

本发明同时也提供了上述的B细胞激活因子拮抗剂、或上述核苷酸序列、或上述基因载体在制备治疗自身免疫疾病的药物中的用途。