[发明专利]一种两阶段高效生产发菜细胞及其胞外多糖的方法有效
| 申请号： | 201010168301.7 | 申请日： | 2010-05-11 |
| 公开（公告）号： | CN101845395A | 公开（公告）日： | 2010-09-29 |
| 发明（设计）人： | 戴玉杰;张峰;谭之磊;杨洪江;贾士儒;张照明 | 申请（专利权）人： | 天津科技大学 |
| 主分类号： | C12N1/12 | 分类号： | C12N1/12;C12P19/04;C12R1/89 |
| 代理公司： | 天津盛理知识产权代理有限公司 12209 | 代理人： | 王来佳 |
| 地址： | 300457 天津*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 阶段 高效 生产 发菜 细胞 及其 多糖 方法 | ||
1.一种两阶段高效生产发菜细胞及其胞外多糖的方法，其特征在于：
(1)第一阶段：取发菜细胞种子液接种到培养容器中，培养基是改良的BG11培养基，培养8-10天，当发菜细胞浓度达到0.5～0.7g/L时进行第二阶段培养；
(2)第二阶段：在第一阶段相同的培养条件下，向上述培养液中加入终浓度为1～20g/L的葡萄糖，培养2-8天，将发菜细胞培养液离心，收集发菜细胞，取离心上清液提取培养液中的胞外多糖。
2.根据权利要求1所述的一种两阶段高效生产发菜细胞及其胞外多糖的方法，其特征在于：所述改良的BG11培养基成分及含量为：
NaNO3 1.5g/L，K2HPO4 0.04g/L，MgSO4·7H2O 0.075g/L，CaCl2·2H2O 0.036g/L，Na2SiO3·9H2O 0.058g/L，柠檬酸0.60mg/L，FeSO4·H2O 4.80mg/L，H3BO4 2.86mg/L，MnCl2·4H2O1.81mg/L，ZnSO4·7H2O 0.20mg/L，EDTA·2Na 1mg/L，Na2MoO4 0.39mg/L，CuSO4·5H2O0.079mg/L，CoCl2 0.01mg/L。
3.根据权利要求1所述的一种两阶段高效生产发菜细胞及其胞外多糖的方法，其特征在于：所述步骤(1)的培养方法为：
取发菜细胞种子液以5～10％(v/v)的接种量接种到培养容器中，培养基是改良的BG11培养基，初始pH9.0，温度为20-30℃，转速80-120r/min或通风比0.06-1.0vvm，光照强度为2500-3500lux，培养8-10天，当发菜细胞浓度达到0.5～0.7g/L时进行下一阶段培养。
4.根据权利要求1所述的一种两阶段高效生产发菜细胞及其胞外多糖的方法：其特征在于：在步骤(1)前还包括制备发菜细胞种子液的步骤是：
将保存的发菜种细胞种接入培养液，在20-30℃静置培养，培养基是改良的BG11培养基，初始pH9.0，光照强度为800-1200lux，培养10-15d后结束培养，静置培养液至细胞完全沉底，弃去上清液，细胞用无菌水重新悬浮，制成发菜细胞种子液。
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