[发明专利]基于单分子计数的肿瘤相关蛋白的检测方法

权利要求书

1.一种肿瘤相关蛋白的检测方法，包括如下步骤：

1)将待检测的肿瘤相关蛋白分子通过配体和受体的特异性相互作用、或者抗体和抗原的特异性相互作用捕获于玻璃片上，然后往所述玻璃片上加入经荧光标记的针对所述待检测的肿瘤相关蛋白分子的抗体，得到待检测的玻璃片；

2)将步骤1)得到的待检测的玻璃片置于全内反射显微镜的物镜上，进行肿瘤相关蛋白的检测。

2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述待检测的肿瘤相关蛋白分子是血小板源性生长因子β受体。

3.如权利要求2所述的检测方法，其特征在于：步骤1)中，所述待检测的玻璃片的制备方法包括如下步骤：

a)将牛血清蛋白BSA吸附在玻璃片上；

b)在步骤a)的基础上往所述玻璃片上加入戊二醛，使得所述戊二醛与所述牛血清蛋白BSA交联；

c)在步骤b)的基础上往所述玻璃片上加入血小板源性生长因子-DD，使得所述血小板源性生长因子-DD与所述戊二醛相交联；

d)在步骤c)的基础上往所述玻璃片上加入所述血小板源性生长因子β受体；

e)在步骤d)的基础上往所述玻璃片上加入经荧光标记的针对所述血小板源性生长因子β受体的抗体，得到待检测的玻璃片。

4.如权利要求3所述的检测方法，其特征在于：所述针对所述血小板源性生长因子β受体的抗体是可商业化途径得到的多克隆抗体。

5.如权利要求3所述的检测方法，其特征在于：所述针对所述血小板源性生长因子β受体的抗体是单克隆抗体，所述单克隆抗体的获得方法是如下I)或II)

I)商业化途径得到；

II)体外培养分泌的针对所述血小板源性生长因子β受体的抗体的杂交瘤细胞得到。

6.如权利要求1-5中任一所述的检测方法，其特征在于：所述玻璃片在步骤1)之前是清洗干净并经过N₂吹干的。