[发明专利]筛选可逆转基因沉寂药物的肿瘤工程细胞及其应用

权利要求书

1.筛选可逆转基因沉寂药物的肿瘤工程细胞，包含有一个报告基因，该报告基因置于一个被表观遗传学水平抑制的启动子控制下，因此该报告基因处于被沉寂的状态。

2.根据权利要求1所述的肿瘤工程细胞，其特征在于：该报告基因为表达增强型绿色荧光蛋白EGFP的报告基因，该报告基因的启动子为CMV启动子，且该启动子区域内的CpG岛被甲基化从而该启动子被抑制；该肿瘤工程细胞还包含有一个新霉素抗性基因neor为选择基因，该选择基因的启动子为SV40启动子。

3.根据权利要求2所述的肿瘤工程细胞，其特征在于：该肿瘤工程细胞源于HCT-116人直结肠癌细胞，并经过基因工程改造以达到权利要求2所述特征；该工程细胞被命名为ECRC-1人直结肠癌工程细胞，保藏号为CCTCC C201044。

4.根据权利要求3所述的肿瘤工程细胞，其特征在于：所述基因工程改造为在HCT-116人直结肠癌细胞的基因组内稳定的整合进一段载体，该载体包含有CpG岛被甲基化的CMV启动子及其所控制的增强型绿色荧光蛋白EGFP报告基因、以及一个SV40启动子及其所控制的新霉素抗性基因neor。

5.根据权利要求2所述的肿瘤工程细胞，其特征在于：该肿瘤工程细胞源于MDA-MB-231人乳腺癌细胞，并经过基因工程改造以达到权利要求2所述特征；该工程细胞被命名为EBTC-1人乳腺癌肿瘤工程细胞，保藏号为CCTCC C201045。

6.根据权利要求5所述的肿瘤工程细胞，其特征在于：所述基因工程改造为在MDA-MB-231人乳腺癌细胞的基因组内稳定的整合进一段载体，该载体包含有CpG岛被甲基化的CMV启动子及其所控制的增强型绿色荧光蛋白EGFP报告基因、以及一个SV40启动子及其所控制的新霉素抗性基因neor。

7.一种根据权利要求1-6中任一项所述的肿瘤工程细胞在筛选用于逆转表观遗传水平基因沉寂的药物上的应用。