[发明专利]一种用于核酸特异识别检测的探针

权利要求书

1.一种用于核酸特异识别检测的探针，其特征在于：

该探针为两条寡核苷酸组成，任一条寡核苷酸的5’端标记有荧光基团，另一条寡核苷酸的3’端标记有淬灭基团，其中第一条寡核苷酸比第二条寡核苷酸长1-3个非互补的碱基，该第一条寡核苷酸非互补的碱基位于第一条链的中间区域，第一条寡核苷酸其余的碱基与第二条寡核苷酸的碱基完全互补；

在一定条件下，探针的2条链由于互补碱基而结合为双链结构，使探针形成一个带有凸环的二级结构；当有靶序列存在时，探针与靶序列杂交，探针自身2条链形成的互补双链打开，凸环结构随即消失。

2.如权利要求1所述的一种用于核酸实时检测的探针，其特征在于：探针第一条链长度为12-80bp，第二条链长度为9-79bp。

3.如权利要求1所述的一种用于核酸实时检测的探针，其特征在于：所述的探针中的核苷酸为DNA或RNA。

4.如权利要求1所述的一种用于核酸实时检测的探针，其特征在于：所述探针的两条链中，至少有一条包括至少一个非自然的核苷。

5.如权利要求2所述的一种用于核酸实时检测的探针，其特征在于：所述探针的互补碱基为12-50bp，探针双链结合区域Tm值为扩增引物Tm值±2℃，或高于退火温度2-10℃。

6.一种实时核酸靶序列扩增及检测方法，其特征在于：靶扩增产物采用荧光标记探针检测，包括使用一种用于核酸实时检测的探针对所述的靶序列进行杂交检测，该核酸实时检测的探针为两条寡核苷酸组成，任一条寡核苷酸的5端标记有荧光基团，另一条寡核苷酸的3端标记有淬灭基团，其中第一条寡核苷酸比第二条寡核苷酸长1-3个非互补的碱基，该第一条寡核苷酸非互补的碱基位于第一条链的中间区域，第一条寡核苷酸其余的碱基与第二条寡核苷酸的碱基完全互补；在一定条件下探针的2条链由于互补碱基而结合为双链结构，使探针形成一个带有凸环的二级结构；当有靶序列存在时，探针与靶序列杂交，探针自身2条链形成的互补双链打开，凸环结构随即消失。

7.如权利要求6所述的一种实时核酸靶序列扩增及检测方法，其特征在于：探针第一条链长度为12-80bp，第二条链长度为9-79bp。

8.如权利要求6所述的一种实时核酸靶序列扩增及检测方法，其特征在于：所述的探针中的核苷酸为DNA或RNA。

9.如权利要求6所述的一种实时核酸靶序列扩增及检测方法，其特征在于：探针的两条链中，至少有一条包括至少一个非自然的核苷。

10.如权利要求6所述的一种实时核酸靶序列扩增及检测方法，其特征在于：所述探针的互补碱基为12-50bp，探针双链结合区域Tm值为扩增引物Tm值±2℃或高于退火温度2-10℃。