[发明专利]一种化合物及其应用于单胺氧化酶活性的荧光检测方法

权利要求书

1.一种如式(I)所示的化合物：

式(I)中，R₂为如式(II)所示的荧光基团：

式(I)中，R₁为C1～C10的烷基、C2～C10的烯基、苯基或苄基。

2.如权利要求1所述的化合物，其特征在于所述的R₁为CH₃、C₂H₅、 C₃H₅或苄基。

3.如权利要求1所述的如式(I)所示的化合物的制备方法，其特征 在于所述的方法包括以下步骤：(a)如式C所示的4-卤代吡啶和卤 代烃R₁X反应，得到式A所示的1-取代-4-卤代吡啶盐，所述X为F、 Cl、Br或I，Y为Cl、Br或I；(b)有机溶剂中，步骤(a)得到的 式A所示的1-取代-4-卤代吡啶盐与荧光化合物H-R₂在碱性物质的作 用下，反应得到式B所示的吡啶类化合物，所述的碱性物质为无机 碱性物质或有机碱性物质；(c)步骤(b)得到的式B所示的吡啶类化 合物与硼氢化钠进行还原反应得到式(I)所示的化合物；

R₂为如式(II)所示的荧光基团：

R₁为C1～C10的烷基、C2～C10的烯基、苯基或苄基。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于所述的无机碱性物质为碳 酸钾、碳酸钠、甲醇钠、氢氧化锂、氢氧化钾、氢氧化钠或氢化钠； 所述的有机碱性物质为三乙胺、N，N-二异丙基乙胺、吡啶或哌啶；所 述的有机溶剂为DMF、DMSO、CH₃CN或C1～C5的脂肪醇。

5.如权利要求3所述的方法，其特征在于所述的方法包括以下步骤： (a)如式C所示的4-卤代吡啶在-10～50℃下，与卤代烃R₁X反应 10～15小时，反应结束后即得到式A所示的1-取代-4-卤代吡啶盐， 所述X为F、Cl、Br或I；(b)步骤(a)得到的式A所示的1-取代 -4-卤代吡啶盐与荧光化合物H-R₂在碱性物质的作用下，以DMF为 溶剂，室温下反应12～16小时，反应结束后反应液过滤，取滤饼得到 式B所示的吡啶类化合物，所述的碱性物质为Na₂CO₃、K₂CO₃、NaOH、 LiOH、KOH、三乙胺、N，N-二异丙基乙胺、吡啶或哌啶；(c)步骤(b) 得到的式B所示的吡啶类化合物在-10～30℃温度下，与硼氢化钠进行 还原反应，反应结束后反应液分离处理得到式(I)所示的化合物纯 品；所述4-卤代吡啶、荧光化合物H-R₂、卤代烃R₁X、碱性物质、 硼氢化钠的物质的量之比为1∶1∶6～10∶1～10∶1～20。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于所述的步骤(c)中，反应 液分离处理方法为：反应结束后，反应液中加入饱和NaCl水溶液， 用乙酸乙酯萃取，取有机层经过干燥、过滤、蒸干，即得所述式(I) 所示的化合物粗品，式(I)所示的化合物粗品进行柱层析，以乙酸 乙酯和石油醚的体积比为5∶1的溶液为流动相，TLC跟踪收集Rf 值为0.3-0.5的洗脱液，收集得到的洗脱液经减压除去溶剂，得到式 (I)所示的化合物纯品。

7.如权利要求1所述的如式(I)所示的化合物的应用，所述应用为 如式(I)所示的化合物作为荧光探针，应用于单胺氧化酶活性的荧 光检测。

8.如权利要求7所述的应用，其特征在于所述的单胺氧化酶活性的 荧光检测的方法为：以如式(I)所示的化合物作为荧光探针，单胺 氧化酶水解荧光探针形成荧光物质，测定荧光强度，从而获得单胺氧 化酶活性强度。