[发明专利]一种连续中压柱层析制备辛弗林的方法

说明书

技术领域：

本发明属于中药化学技术领域，涉及一种连续中压柱层析制备辛弗林的方法。

背景技术：

辛弗林(Synephrine)，分子式：C₉H₁₃NO₂；分子量：167.20。

分子式结构为：

白色结晶性粉末，mp.184℃-185℃，盐酸盐结晶熔点151～152℃，易溶于水。

辛弗林主要来自芸香科植物酸橙的干燥幼果。其药理作用主要表现为升高血压，促进脂肪分解，降血脂，具有肾上腺素样作用。临床上主要用于治疗支气管哮喘、低血压、虚脱及休克、食积不化、胃下垂等，辛弗林还具有提高新陈代谢、增加热量消耗的作用。目前枳实提取物作为减肥商品制剂，主要以辛弗林含量为检测指标。

青皮中辛弗林含量为0.44％-0.55％，陈皮中辛弗林含量为0.25％-0.89％。

公开号为CN1318538A的中国专利介绍了“从中药枳实中提取辛弗林的方法”，它是将枳实水提醇沉、砂滤，上阳离子树脂柱，先用水冲洗，再用氨水洗脱，浓缩氨水洗脱液直接析晶，重结晶得辛弗林。此法使用阳离子交换树脂柱，易发生消旋化，降低辛弗林的生理活性。

公开号为CN101390975A的中国专利将柑橘果皮货未成熟的柑橘果实干燥粉碎后用超临界流体作为萃取介质进行萃取，生产设备投资高，运营成本高，不利于大规模生产。

公开号为CN101402577A的中国专利公开了“从个青皮中提取分离左旋-辛弗林的方法”，用15％-45％乙醇65℃回流提取两次，浓缩后上D101大孔树脂吸附，15％乙醇洗脱，减压浓缩，喷雾干燥得左旋-辛弗林粗品，纯乙醇溶解，硅胶柱分离纯化，减压浓缩、喷雾干燥。该方法洗脱时间长，仍有部分辛弗林消旋化。

发明内容：

本发明的目的在于提供一种连续中压柱层析制备辛弗林的方法。为了达到上述目的，本发明采用的技术方案包括：以枳实、青皮、陈皮为原料，将原料用酸水浸泡，微波辅助提取2-4次，过滤，然后加入碱水调节pH至9-10，再用氯仿萃取，弃去氯仿层，碱水层浓缩至干，得上柱样品，使用中压氧化铝填充柱，将氧化铝用氯仿分散后湿法装柱，流动相溶解样品，以氯仿-甲醇-氨水混合溶液为洗脱剂，收集含辛弗林流分，无水硫酸钠干燥，干燥后的有机溶剂减压浓缩，静置结晶，滤出结晶，乙醚-乙醇重结晶，结晶产物经冷冻或喷雾干燥，可获得高纯度辛弗林。使用后的层析柱用甲醇再生，氯仿平衡后可重复使用。

填充氧化铝粒径为200-400目，每次上柱所用的样品质量与柱中氧化铝质量之比在1∶15-1∶50之间，柱压为0.1-5MPa。

所用的酸为0.1-1％盐酸溶液，液料比为6∶1-15∶1(L/kg)。

所用的碱为氨水或碳酸氢钠溶液。

洗脱剂为氯仿-甲醇混合溶液，体积比为2-4∶5-8。

分段收集的流分含量高于65％的进入结晶过程，含量低于65％的按照上述分离方法重新上样分离。

重结晶所用溶剂乙醚和乙醇的体积比为1∶1-1∶6。

结晶干燥方法可选冷冻干燥或喷雾干燥中的一种。

综上所述，本发明的优点是：

1、本发明改变了传统的生产工艺，本法的层析柱可重复使用。

2、纯化过程无污染，溶剂可回收利用，便于工业连续化生产。

3、生产周期短，最大限度保留了辛弗林的生理活性。

具体实施方式：

实施例1：

将枳实粉碎，磨成细粉，称取1kg枳实细粉，加入6L0.1％盐酸溶液浸泡2小时，微波提取3次，每次20分钟，合并提取液，加入氨水溶液调pH至9，过滤，加入等体积氯仿萃取，弃去氯仿层，减压浓缩碱水液至干。将200-300目碱性氧化铝15kg用氯仿混悬后，驱除气泡，加入玻璃层析柱中，上述浓缩至干的辛弗林粗品加入1.5L氯仿-甲醇(4∶8)溶解，滤出不容物后用柱塞式溶剂泵上于柱头，然后泵入氯仿-甲醇(4∶8)洗脱，分段收集流分，TLC和HPLC监测，合并含量65％以上的流出液，加无水硫酸钠干燥，干燥后的洗脱剂减压浓缩，静置结晶，滤出结晶，粗晶再用乙醚-乙醇(1∶3)重结晶2次，减压过滤，冷冻干燥，得4.3g辛弗林纯品，纯度95.3％。含量65％以下的流出液减压回收试剂后得浓缩物作为下次柱层析的原料，回收的洗脱剂经薄层层析校正后下次重复使用。

实施例2：