[发明专利]一种重组抗栓肽突变体、制备方法及用途有效
| 申请号： | 201010155967.9 | 申请日： | 2010-04-27 |
| 公开（公告）号： | CN101921326A | 公开（公告）日： | 2010-12-22 |
| 发明（设计）人： | 劳兴珍;高向东;郑珩 | 申请（专利权）人： | 中国药科大学 |
| 主分类号： | C07K14/435 | 分类号： | C07K14/435;C12N15/12;C12N15/70;A61K38/17;A61P7/02 |
| 代理公司： | 南京苏科专利代理有限责任公司 32102 | 代理人： | 孙立冰 |
| 地址： | 211198 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 重组 抗栓肽 突变体 制备 方法 用途 | ||
1.一种重组抗栓肽突变体，其特征是：具有SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列。
2.权利要求1的重组抗栓肽突变体的制备方法，依次包括下列步骤：
a、采用序列重叠的方法进行聚合酶链式反应扩增获得抗栓肽突变体的基因，四个参与PCR的序列分别为：
P1：5’-AAA GGT ACC GAC GAC GAC GAC AAG GCA CCG CGT CTG CCG CAGTGC CAG GGT GA-3’
P3：5’-CTG CCG CAGTGC CAG GGT GAC GAC CAG GAAAAA TGC CTG TGCAAC AAA GAC GAA TGC-3’
P4：5’--AGT CAC CAC GCG GGA AAC GGC ACT GAC CCG GCG GGC ATT CGTCTT TGT TGC ACA-3’
P2：5’--CCC AAG CTT TTA TTC GCA GTA CGG GTC CCA GTC ACC ACG CGGGAAACG G-3’
b、突变体基因以限制性内切酶HindIII及Kpn I进行双酶切后插入原核表达载体pET32a形成的表达质粒，转化大肠杆菌，异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导基因表达；
c、工程菌发酵后离心收集菌体，超声破碎细菌，离心，收集细菌裂解液，用Ni金属螯合层析柱纯化产品，即得。
3.权利要求1的重组抗栓肽突变体用于制备抑制血小板聚集的药物的用途。
4.一种药物组合物，其中含有权利要求1的重组抗栓肽突变体和药学上可接受的载体。
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