[发明专利]鉴别内源性和外源性禽白血病病毒的三重PCR试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及一种鉴别禽白血病病毒的试剂盒，尤其涉及一种能同时 鉴别内源性和外源性禽白血病病毒的三重PCR试剂盒，属于禽白血病病 毒的检测领域。

背景技术

禽白血病(Avian leukosis，AL)是由反转录病毒科甲型反转录病毒 属禽白血病病毒(ALV)引起的禽类造血组织中某些细胞成分过度增生的 肿瘤性疾病(赵振华，杨玉莹，成子强.禽白血病[M].北京：中国农业出 版社，2006：11-12.)。虽然该病的死亡率较低，但该病的持续感染将导致 鸡群的免疫抑制和生产力下降，从而严重损害鸡群的经济价值。

根据致病性和感染宿主的不同，ALV可划分为A-J 10个亚群(靳艳 玲，罗薇.禽白血病研究进展[J].西南民族大学学报，2005，24(4)：44- 46)，仅A-E和J亚群从鸡分离到，其余亚群见于其他鸟类。其中A-D 为外源性ALV，主要感染蛋鸡，A、B亚群主要诱发鸡的淋巴细胞白血 病，C、D亚群在田间极为少见；E-I亚群为内源性ALV，主要感染野生 狩猎禽类(杨玉莹.J亚群禽白血病病毒研究进展[J].中国病毒学，2003， 18(1)：93-97)，其中E亚群是整合在鸡基因组中的一种前病毒序列，在鸡 中普遍存在；J亚群具有独特的亚群特异性，主要引起肉鸡的髓细胞瘤， 近年来蛋鸡感染ALV的报道逐渐增多。外源性ALV能诱发肿瘤，可垂 直和水平传播，而内源性ALV的致瘤性虽然很低且不能产生传染性病毒 粒子，但与外源性ALV的重组可能导致高致病性毒株的产生(Bai L.N. Payne，and M.A.Skinner.HPRS-103(exogenous avian leukosis virus， subgroup J)has an env gene related to those of endogenous elements EAV-0 and E51 and an E element found previously only in sarcoma viruses[J].Virol， 1995，69(5)：779-784)。因此内外源性ALV的鉴别诊断对评估AL的致病 性具有积极的意义。

禽白血病是严重危害养禽业的重要疫病之一，不同品种品系的鸡群 均可感染ALV，造成性成熟推迟，产蛋率、蛋重、受精率和孵化率等生产 性能下降，更为严重的是，禽白血病会损害机体的免疫系统，并且长期带毒， 造成本病的进一步传播(李新华.禽白血病流行病学特点及防制措施[J]. 养禽与禽病防治，1997，20(4)：11-12.)。近年来的报道已经证实马立克氏 病等禽类疫苗中混合感染ALV-A和ALV-E的情况时有发生(Marsh J， Bacon L，Fadly A，et al.Effect serotype 2 and 3 Marek′s disease vaccines on the development of avian leukosis virus-induced pre-neoplastic bursal follicles [J].Avian Diseases，2005，39(4)：43-45.)，且在黄热病和麻疹等人用疫苗 内也发现了ALV的污染(Althaf I，Jeffrey A，Marcos D，et al.Identification and characterization of avian retroviruses in chicken embryo-derived yellow fever vaccines[J].Virology，2003，77(2)：1105-1111.)，尽管内源性ALV污 染的危害尚待进一步证实，但外源性ALV与疫苗来源细胞内的内源性 ALV的基因重组，很可能加速ALV囊膜蛋白的变异速度(Althaf I，Jeffrey A，Marcos D，et al.Identification and characterization of avian retroviruses in chicken embryo-derived yellow fever vaccines[J].Virology，2003，77(2)：1105- 1111.)。由于ALV亚群和毒株的多样性、相关内源性病毒的广泛存在，使 本病的检测和净化很难取得理想的效果。