[发明专利]一种沙门氏菌与志贺氏菌联合检测试剂盒及其检测方法

权利要求书

1.一种沙门氏菌与志贺氏菌联合检测试剂盒，包括Bst DNA聚合酶，缓冲液，dNTPs，甜菜碱，硫酸镁，显色液，稳定液和阳性对照，其特征在于：还包括以沙门氏菌AgfA基因，志贺氏菌的ipaH基因为靶基因、基于环介导恒温扩增技术设计的各两对引物：内引物FIP/BIP和外引物F3/B3。

2.根据权利要求1所述的沙门氏菌与志贺氏菌联合检测试剂盒，其特征在于：所述的沙门氏菌，志贺氏菌的两对内外引物序列分别为：

沙门氏菌属

AgfA-9-F3：AGTTTCTGGCAGTGCTGTG    SEQ ID NO 1

AgfA-9-B3：AGTACTGTTATCCGCACCCT   SEQ ID NO 2

AgfA-9-FIP：ATCCGGGCCGGAACTATTGCTTTTCTGGCGTCGTTCCACAAT   SEQ ID NO 3

AgfA-9-BIP：CGCTTGCTCTGCAAAGCGATGTTTTACCATAACCGCTCTGGGT  SEQ ID NO 4或

AgfA-56-F3：CCCGGATTCCACGTTGAG    SEQ ID NO 5

AgfA-56-B3：TCGGAGTTTTTAGCGTTCCA  SEQ ID NO 6

AgfA-56-FIP：CCGCTCTGGGTAATGGTCGTTTTTTCTAACGCTGCGCTTGCTC  SEQ ID NO 7

AgfA-56-BIP：ATGTAGGCCAGGGTGCGGATATTTTTGGTCGATGGTGGCATTG  SEQ ID NO 8或

AgfA-19-F3：AGTTTCTGGCAGTGCTGTG  SEQ ID NO 9

AgfA-19-B3：AGTACTGTTATCCGCACCCT SEQ ID NO 10

AgfA-19-FIP：ATCCGGGCCGGAACTATTGC CTGGCGTCGTTCCACAAT   SEQ ID NO 11

AgfA-19-BIP：CGCTTGCTCTGCAAAGCGATG ACCATAACCGCTCTGGGT  SEQ ID NO 12或

AgfA-156-F3：CCCGGATTCCACGTTGAG    SEQ ID NO 13

AgfA-156-B3：TCGGAGTTTTTAGCGTTCCA  SEQ ID NO 14

AgfA-156-FIP：CCGCTCTGGGTAATGGTCGT TCTAACGCTGCGCTTGCTC  SEQ ID NO 15

AgfA-156-BIP：ATGTAGGCCAGGGTGCGGATAT GGTCGATGGTGGCATTG  SEQ ID NO 16志贺氏菌属

ipaH-69-F3：ACATGAAGAGCAYGCCAACA其中Y代表C或T SEQ ID NO 17

ipaH-69-B3：TCCTCACAGCTCTCAGTGG  SEQ ID NO 18

ipaH-69-FIP：CGGAATCCGGAGGTATTGCGTGTTTTCCTTTTCCGCGTTCCTTGA  SEQ ID NO 19

ipaH-69-BIP：GGTCGCTGCATGGCTGGAAATTTTGCAGCAACAGCGAAAGACT  SEQ ID NO 20或

ipaH-169-F3：ACATGAAGAGCAYGCCAACA其中Y代表C或T SEQ ID NO 21

ipaH-169-B3：TCCTCACAGCTCTCAGTGG  SEQ ID NO 22

ipaH-169-FIP：CGGAATCCGGAGGTATTGCGTG CCTTTTCCGCGTTCCTTGA  SEQ ID NO 23

ipaH-169-BIP：GGTCGCTGCATGGCTGGAAA GCAGCAACAGCGAAAGACT  SEQ ID NO 24

3.根据权利要求1所述的沙门氏菌与志贺氏菌联合检测试剂盒，其特征在于：所述的BstDNA聚合酶浓度7-10U/μL。

4.根据权利要求3所述的沙门氏菌与志贺氏菌联合检测试剂盒，其特征在于：所述的BstDNA聚合酶酶浓度8U/μL。