[发明专利]表达PRRSV免疫原基因的重组杆状病毒及其制备和应用无效
| 申请号： | 201010140792.4 | 申请日： | 2010-04-07 |
| 公开（公告）号： | CN101792740A | 公开（公告）日： | 2010-08-04 |
| 发明（设计）人： | 许信刚;童德文;张琪 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学 |
| 主分类号： | C12N7/01 | 分类号： | C12N7/01;C12N15/40;C12N15/866;A61K48/00;A61K39/12;A61P31/14 |
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| 地址： | 71210*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 表达 prrsv 免疫原 基因 重组 杆状病毒 及其 制备 应用 | ||
1.一种表达PRRSV免疫原基因的重组杆状病毒，其特征在于，所述重组 杆状病毒带有SEQ ID NO.1所示的序列，所述重组杆状病毒表面展示PRRSV 结构蛋白GP3，
其中，所述重组杆状病毒的制备方法，步骤包括：
a、制备PRRSV结构蛋白GP3基因ORF3；
b、将上述的ORF3基因，插入到杆状病毒表面展示转座载体pBacSC的p10 启动子下游，构建含PRRSV的ORF3基因的重组杆状病毒转座质粒 pBacSC-ORF3；
c、将上述重组杆状病毒转座质粒pBacSC-ORF3转入大肠杆菌内进行同源 重组，得重组杆状病毒DNA；
d、将步骤c得到的重组杆状病毒DNA转染昆虫细胞，得到重组杆状病毒。
2.根据权利要求1所述的重组杆状病毒的制备方法，其特征在于，所述 ORF3基因的制备方法为：用PCR方法扩增了PRRSV陕西株ORF3基因，并 将其克隆到pMD18-T载体，构建了pMD18T-ORF3质粒，酶切pMD18T-ORF3 质粒，回收ORF3基因。
3.根据权利要求1所述的重组杆状病毒的制备方法，其特征在于，步骤d 所述重组杆状病毒DNA转染昆虫细胞的方法为：将重组杆状病毒DNA通过脂 质体介导方法转入昆虫细胞中。
4.根据权利要求1所述的重组杆状病毒的制备方法，其特征在于，步骤c 所述大肠杆菌为感受态大肠杆菌DH10Bac。
5.如权利要求1所述的重组杆状病毒在制备猪繁殖与呼吸综合症病毒疫 苗中的应用。
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