[发明专利]一种复方骨肽注射液及注射用复方骨肽的制备方法

说明书

技术领域：

本发明属于医药技术领域

背景技术

复方骨肽注射液及注射用复方骨肽是由健康的猪或胎牛四肢骨和全蝎制成的灭菌水溶液及加入适量赋料冻干制成的冻干剂。主要成分为有机钙、磷、无机钙、无机盐、微量元素、氨基酸等。用于治疗风湿、类风湿性关节炎、骨质增生、骨折。

该品种为我国首例，其工艺过程文献有多处报道，但通过我们的实际操作，均无法制成合格产品，本发明详细描述了一种制造方法，简单、适用、安全，完全可以达到国家药品标准的具体要求。

发明内容是

a、骨的提取、去脂、浓缩：取健康新鲜猪或胎牛四肢骨，洗净，打碎称重。每公斤骨加水1-3kg，于1.1-1.3kg/cm²热压1-3小时，用双层纱布过滤，骨渣再加与原骨同量的水，同上操作热压1-2小时，过滤，合并两次滤液。于夹层锅内冷却至室温，放置于-10至-30℃冷库中，待冷却至0～5℃转入冷室中静置12～24小时，撇去上层脂肪，加温使冻状物融成液体，可加热浓缩至每公斤提取物含相当于0.5公斤骨。

b、水解：将上述提取物调pH2.5-3.5左右，按骨重的1～3％加入胃蛋白酶，于38℃至42℃水解3-5小时。

c、酸沉：将上述液于100℃加热30分钟左右，继续酸水解，冷却吸出上清。

d、碱沉：上述上清调pH8-9，加热至沸腾，持续30分钟左右，继续碱水解冷却，吸上清。

e、超滤：上述上清液调pH至7.0-7.5，过滤至清，过一万分子量超滤1-3次，即得骨提取物溶液。

f、蝎子的清洗，绞碎：称量适量全蝎，用纯净水洗涤二次，用剪刀剪碎.

g、蝎子的乙醇提取：按蝎重的二倍(W/V)加入95％乙醇，搅拌提取5小时左右，静止过夜后过滤，反复二次，合并两次的乙醇提取液。

h、回收乙醇：乙醇提取物真空浓缩至一半左右，加入蒸馏水至全体积，再蒸出一半体积，反复数次至无乙醇味，加水至全蝎重量的两倍，得浓缩液。

i、分层过滤：将浓缩液静止分层过夜，然后分出下层水溶液，上层脂肪层弃去，提取的水溶液合并。

j、超滤：水溶液粗滤后1万分子量超滤1-3次，称量体积。

k、骨提取液与蝎子提取液的混合

按终体积每1m1中含0.015g全蝎的提取物计，将全蝎提取物与骨提取物混合。

1、超滤，浓缩

上述混合液过1万分子量超滤柱1-3次，将超滤液浓缩，至每ml中多肽和氮含量合格，同时含全蝎提取物相当于0.015g全蝎。

m、制剂

复方骨肽溶液稀释或浓缩至所需浓度范围，亦可加入适量氯化钠调至等渗，调节pH值在标示范围内，除菌过滤，灌封，亦可过一万分子量超滤器一次后，除菌过滤，灌封，于100℃热压灭菌30分钟或115℃30分钟、121℃12分钟、15分钟灭菌，检验，灯检，包装即得复方骨肽注射液。将复方骨肽溶液化透后，加入适量甘露醇或右旋糖酐做为赋型剂(一般为溶液量的10％-15％)，过0.22μm微孔滤膜，灌装，冷冻干燥，即得注射用复方骨肽。

其特征是：

a、制造过程简便，适用性强。

b、反复的酸碱热沉，保证了制剂可见异物合格。

c、本工艺采用121℃12-30分钟热压，保证了病毒灭活条件，也对制剂的可见异物合格有利。

d、注射剂采用121℃12-30分钟灭菌，保证了F₀值大于8，无菌保障水平高。

具体实施实例

取健康新鲜猪四肢骨75kg，洗净，打碎称重。加水75kg，于1.2kg/cm²热压2小时，用双层纱布过滤，骨渣再加与原骨同量的水75kg，同上操作热压1-2小时，过滤，合并两次滤液。于夹层锅内冷却至室温，放置于-10至-30℃冷库中，待冷却至0～5℃转入冷室中静置12～24小时，撇去上层脂肪，加温使冻状物融成液体。将上述提取物调pH2.5-3.5左右，按骨重的2％加入胃蛋白酶，于38℃至42℃水解4小时。将上述液于100℃加热30分钟，继续酸水解，冷却吸出上清。上述上清调pH8.5左右，加热至沸腾，持续30分钟，继续碱水解冷却，吸上清。上述上清液调pH至7.4，过滤至清，过一万分子量超滤二次，即得骨提取物溶液约150kg，测得多肽浓度为8.5mg/ml。