[发明专利]一种转基因水稻品系的外源插入片段的旁侧序列无效
| 申请号： | 201010137449.4 | 申请日： | 2010-04-01 |
| 公开（公告）号： | CN102212528A | 公开（公告）日： | 2011-10-12 |
| 发明（设计）人： | 徐俊锋;汪小福;陈笑芸;张小明 | 申请（专利权）人： | 浙江省农业科学院 |
| 主分类号： | C12N15/29 | 分类号： | C12N15/29;C12P19/34;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 310021 *** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 转基因 水稻 品系 插入 片段 旁侧 序列 | ||
1.一种转基因水稻品系浙粳22Bt的外源插入片段的旁侧序列，所述旁侧序列为5’端旁侧序列，其特征在于：5’端旁侧序列如SEQ ID NO1所示。
2.一种转基因水稻品系浙粳22Bt的外源插入片段的旁侧序列，所述旁侧序列为3’端旁侧序列，其特征在于：3’端旁侧序列如SEQ ID NO2所示。
3.根据权利要求1或2所述的旁侧序列，其特征在于该旁侧序列是通过Tail-PCR和LD-PCR扩增得到。
4.一种转基因水稻品系浙粳22Bt的外源插入片段的旁侧序列的定性PCR检测方法，其特征在于：所述PCR反应中的两条引物组合为权利要求1所述旁侧序列的特异性引物：一条引物为依据SEQ ID NO1中1-423位序列设计的正向引物，另一条引物为依据SEQ ID NO1的424-481位序列设计的反向引物。
5.根据权利要求4所述的一种转基因水稻品系浙粳22Bt的外源插入片段的旁侧序列的定性PCR检测方法，其特征在于所述正向引物为ZJ22Bt-LB-1F：5-TCCAGTCGGGAAACTTGTCGT-3’；所述反向引物为ZJ22Bt-LB-1R：5’-TCTCCTAGAGGCTGACATGTG-3’。
6.一种转基因水稻品系浙粳22Bt的外源插入片段的旁侧序列的定性PCR检测方法，其特征在于：所述PCR反应中的两条引物组合为权利要求2所述旁侧序列的特异性引物：一条引物依据SEQ IDNO2中1-180位序列设计的正向引物，另一条引物依据SEQ ID NO2的181-560位序列设计的反向引物。
7.根据权利要求6所述的一种转基因水稻品系浙粳22Bt的外源插入片段的旁侧序列的定性PCR检测方法，其特征在于所述正向序列为ZJ22Bt-RB-2F：5’-ACAGTTGCGCAGCCTGAATGG-3’；所述反向序列为ZJ22Bt-RB-2R：5’-CTGTTGCATGCACACGGATGG-3’。
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