[发明专利]一种用磁珠分离基因组DNA试剂盒及其应用无效
| 申请号: | 201010135963.4 | 申请日: | 2010-03-30 |
| 公开(公告)号: | CN101792757A | 公开(公告)日: | 2010-08-04 |
| 发明(设计)人: | 周卫东 | 申请(专利权)人: | 上海鼎国生物技术有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/68 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 200052 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 用磁珠 分离 基因组 dna 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种用磁珠分离基因组DNA试剂盒及其应用,其技术体系包括:
(1)磁球的制备;
(2)磁球配基修饰;
(3)磁架的设计及制造;
(4)基因组DNA提取试剂;
(5)基因组DNA提取的方法。
2.根据权利要求1所述,其特征在于,它是一种用磁珠分离基因组DNA的试剂盒。
3.根据权利要求1所述,其特征在于,用硫酸铁铵((NH4)Fe(SO4)2)利七水合硫酸亚铁((NH4)2Fe(SO4)2)为磁性材料,通过共沉淀的方法来合成磁球。其中,硫酸铁铵和七水合硫酸亚铁的用量分别为9.6克和3.0克,合成过程中温度保持在50度,通氨水的时间是30分钟,其间要通氮气,并且以1000rpm转速搅伴。反应一小时后,磁球就合成了。合成的磁球可以修饰不同的配基,作为吸附和结合相应分子的载体。
4.根据权利要求1或权利要求3所述,其特征在于,磁球修饰配基,以硅酸钠为材料修饰配基为SiO2,用于吸附基因组DNA。
5.根据权利要求1所述,其特征在于,配有磁架,其作用为吸附磁珠。
6.根据权利要求1所述,其特征在于,基因组DNA提取试剂,包括裂解液(100mM Tris-Cl,1.4M NaCl,50mM EDTA,2%CTAB(动物、细菌等为10%SDS)pH8.0),结合液(3M NaAc pH 5.2),洗液A(100mMTris-Cl,0.5MNaCl,1mM EDTA.pH8.0 40%乙醇),洗液B(25mM Tris-Cl(8.0),1MNaCl pH8.070%乙醇),洗脱液(10mmol/L Tris-Cl和1mM EDTA,pH 8.0)。所述试剂根据材料不同,裂解液不同。
7.根据权利要求1所述,其特征在于,基因组DNA提取的方法。所用方法根据材料不同,方法稍有调整,主要步骤包括细胞裂解、核酸吸附、杂质去除和核酸洗脱。
8.根据权利要求1或权利要求2所述用磁珠分离基因组DNA试剂盒,其特征在于可以从动物、植物、细菌、真菌、血液、病毒、动物源饲料、法医学样品等分离基因组DNA,所获得的基因组DNA可以用于PCR扩增、基因克隆、基因组文库构建、测序、分子杂交和分子标记等实验。
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