[发明专利]一种萃取分离L-辛弗林的方法

说明书

一、技术领域

本发明属于L-辛弗林分离纯化的技术领域，具体涉及采用反胶束萃取技术萃取分离L- 辛弗林的方法。

二、背景技术

L-辛弗林，又名对羟福林、脱氧肾上腺素等，存在于芸香科植物酸橙的干燥幼果，柑橘 属植物橘的幼嫩落果，仙人掌科植物刺仙人球等植物中，属小分子生物碱。L-辛弗林具有收 缩血管、升高血压和较强的扩张气管和支气管的作用，用于休克，心衰，治疗支气管哮喘； 能够提高新陈代谢、增加能量水平，氧化脂肪，有减肥效果；是一种天然兴奋剂，无副作用。 因此辛弗林广泛应用于医药、食品、饮料等保健行业。

L-辛弗林既可化学合成又可从植物中提取，化学合成法虽简化了从多种物质成分中分离 的工序，但合成的辛弗林是DL-外消旋体，尚无高效的分离纯化方法，加之D-对映体可能存在 明显的副作用，这严重制约了化学合成法在L-辛弗林生产方面的应用。因此，从植物中提取 分离成为目前获得L-辛弗林的唯一方法。但是，L-辛弗林含量较低，即使是在含量较高的枳 实、青皮等植物中，其含量较高也仅为0.2-0.4％。因此，高效分离天然L-辛弗林成为本领域 的关键。

现有分离L-辛弗林的方法，如2009年4月8日公开的公开号为CN101402577的“从个青皮 中提取分离左旋-辛弗林的方法”专利，公开的方法是：用15～45％乙醇于80℃条件下回流 提取个青皮细粉中左旋-辛弗林两次，将提取液减压浓缩至含固形物80～85％后上D101大孔吸 附树脂柱，用15％乙醇洗脱；将洗脱液减压浓缩，喷雾干燥，得左旋-辛弗林粗品；用纯乙醇 溶解左旋-辛弗林粗品，加入与粗品等质量的硅胶，搅拌均匀，去除乙醇，制备硅胶吸附样品， 干法上样，按体积比用二氯甲烷∶甲醇∶氨水＝6～9∶2∶0.1配制的洗脱液洗脱收集左旋- 辛弗林组分；将硅胶柱分离洗脱的左旋-辛弗林组分进行减压浓缩，喷雾干燥，获左旋-辛弗 林产品。该方法的主要缺点是：含固形物80～85％的提取液流动性差，不易上柱，传质阻力 大，能耗大，效率较低；对其粗品用硅胶柱分离的能耗大，硅胶重复使用性差，资源消耗大； 使用甲醇、二氯甲烷等有毒有机溶剂，污染严重，生产的安全性差，不利于规模化生产。

三、发明内容

本发明的目的是针对现有分离L-辛弗林方法的不足之处，提供一种萃取分离L-辛弗林的 方法，具有在常温下即可实现对L-辛弗林的高效纯化，有机溶剂可反复使用，成本较低，操 作简单，产品纯度高，无“三废”排放等特点。

本发明的机理：枳实中含有L-辛弗林、多糖、杂蛋白等物质。本发明利用L-辛弗林易溶 于乙醇的特点，用一定浓度的乙醇-水溶液溶解枳实中的L-辛弗林，而多糖则不溶解，以沉淀 形式析出，经过过滤，与L-辛弗林分离；又利用超滤使原料液中的溶剂及小分子溶质从高压 进料液测透过膜进入低压侧，而大分子则被超滤膜所阻留进行分离，除去多糖后，L-辛弗林- 乙醇溶液中还含有大分子的杂蛋白，其分子量3000Da以上，故选用合适的超滤膜除去L-辛弗 林-乙醇溶液中大分子杂蛋白，获得除去杂蛋白的超滤液。超滤液中的L-辛弗林带正电荷，可 与反胶束中的负电荷表面活性剂P204形成静电相互作用，从而实现反胶束萃取；荷载于反胶 束中的L-辛弗林可与反萃取剂中的K⁺交换，进入反萃取相，从而实现反萃取，获得反萃取溶 液；反萃取溶液中的盐类分子量低于100Da，因此通过选取合适的透析袋可除去分子量较小的 盐类；再经过真空浓缩及冷冻干燥，即获得纯度较高的L-辛弗林冻干粉。

本发明的目的是这样实现的：一种萃取分离L-辛弗林的方法，以市售枳实为原料，经溶 解及抽滤、超滤分离、反胶束萃取、反萃取，真空浓缩及冻干，制得L-辛弗林冻干粉。其具 体的方法步骤如下：

(1)醇溶及抽滤

以市售枳实为原料，以60％的乙醇溶液为溶剂，按枳实的质量(g)∶60％的乙醇溶液体积(mL) 之比为1∶9～10的比例，在枳实中加入体积分数为60％的乙醇溶液，搅拌溶解20～40分钟，然 后抽滤，分别收集滤液和滤渣。收集的滤液，用于下一步进行超滤。对于滤渣，因含有大量 的多糖，经干燥后用作食用菌的发酵添加剂。

(2)超滤分离