[发明专利]一种富硒酵母培养物的生产方法

说明书

技术领域

本发明涉及微生物培养物及其微生物发酵方法，具体地说涉及一 种富硒酵母培养物的生产方法。

背景技术

硒是动物必需的微量元素。由于无机硒具有毒性，利用率低，出 于环保要求，添加量受到限制，提倡使用有机硒。目前有机硒主要有 硒代蛋氨酸，纳米硒和酵母硒。酵母硒是将酵母细胞培养在含无机硒 培养基中，通过生物转化将无机硒转变成有机硒而得到的。主要结合 形式包括取代含硫氨基酸中的硫以及以共价键同肽、蛋白结合，少量 同多糖结合。

目前国际上酵母硒产品，多通过液体发酵、固体吸附方法进行生 产。该类方法存在以下不足：(1)酵母发酵生成的益生成分有限；(2) 投资额度大；(3)无机硒的转化率较低，因而生产成本高；(4)存在废 液废渣排放的问题，有必要加以进一步改进。

CN1836545涉及富硒禽饲料制备方法，特征在于如何使用酵母 硒，并未涉及发酵方法；CN101139554涉及中草药酵母硒的固态发酵 制备方法，特征在于结合中草药固体发酵，重点在中草药，很难保证 获得稳定的硒转化率；CN1618316涉及奶牛热应激缓解剂及其制备方 法和应用，特征在于如何使用酵母硒，并未涉及发酵方法。

本发明采取的方法是在液体发酵的基础上，引入固体发酵，采用 液体与固体两相发酵方法，在固体发酵阶段对富硒酵母进行破壁，生 产富硒酵母培养物。酵母培养物(Yeast culture)方法不同于常见的 活细胞酵母方法，要在菌体达到一定数量后进行破壁，酵母培养物不 含许多活酵母菌，而以酵母发酵的代谢产物、变性培养基、酵母细胞 壁和酵母内容物为主。目前还没有采用液体-固体两相发酵方法，将 酵母培养物与硒转化结合在一起的现有技术。

发明内容：本发明要解决的技术问题是提供一种能够实现充分富 硒的通过液体与固体两相发酵生产富硒酵母培养物的方法。

在一个实施方案中，所述生产酵母培养物的方法包括：

(1)菌种筛选：通过酵母在无机硒或有机硒培养基中的生长表现 确定所用菌株；

(2)利用(1)中确定的菌株进行菌种逐级扩大培养；

(3)在含有无机硒或有机硒的液体培养基中用酵母菌进行液体发 酵转化；

(4)液体发酵后，将液体发酵液与固体培养基混合，进行固体发 酵，所述固体发酵包括：先进行固体有氧发酵，再进行固体厌氧发酵 并对酵母进行破壁；

(5)对固体发酵产物进行干燥得到成品。

在一个实施方案中，本发明所述酵母为热带假丝酵母或酿酒酵 母。

在一个实施方案中，本发明所述无机硒为正四价无机硒或正六价 无机硒，优选为亚硒酸钠。

在一个实施方案中，本发明所述有机硒为蛋白硒、氨基酸硒或多 糖硒。

本发明方法中的菌种筛选步骤中，可通过酵母在高浓度正四价或 正六价无机硒培养基中的生长表现确定所用菌株，所述浓度优选为 0.1％～0.5％重量。

本发明的菌种扩大培养可以是逐级扩大培养，可包括斜面培养、 摇瓶扩大培养和种子罐扩大培养，优选包括平皿培养和斜面、摇瓶培 养。

在本发明的液体发酵转化步骤中，液体培养基中无机硒或有机硒 含量可以为0.05％～0.4％重量，优选0.1％～0.2％重量。

在本发明的液体发酵转化步骤中，液体发酵转化时间可以为12～ 48小时，优选18～48小时。

在本发明的固体发酵步骤中，可以将液体发酵液与固体培养基按 1∶3～1.5∶1重量，优选1∶2重量的比例混合。

本发明所述固体培养基可以含有豆粕(饼)、棉粕(饼)、菜粕 (饼)、花生粕(饼)、胡麻粕(饼)、甜菜粕(饼)、麦麸、稻糠、 次粉、木薯粉、大豆皮、玉米酒精糟、玉米或大米，或者其中一种或 多种的混合物；优选含有豆粕(饼)、棉粕(饼)、菜粕(饼)、玉 米或麦麸，或者其中一种或多种的混合物。

本发明方法中所用的固体培养基可以直接使用或经过灭菌处理 后使用。

本发明的固体发酵可以利用堆放、容器、袋或固体发酵反应器进 行。

在本发明方法的一个实施方案中，所述固体有氧发酵进行16-36 小时，优选24-36小时。

在本发明方法的一个实施方案中，所述固体厌氧发酵并对酵母进 行破壁的过程在40～60℃，优选在50℃下进行。该过程可进行6～ 24小时，优选12小时。