[发明专利]异戊酰螺旋霉素III的分离制备及其应用

说明书

技术领域：

本发明涉及抗生素的分离及其在抗感染性疾病中的应用，特别涉及异戊酰螺旋霉素单组分。 

背景技术：

可利霉素是利用基因工程技术研制的新型螺旋霉素衍生物，原命名为必特霉素，曾用名为生技霉素[专利号：ZL97104440.6]。根据“中国药品通用名称命名原则”，经国家药典委员会技术审核及研究确定，必特霉素的中文通用名称更改为可利霉素，英文名称为Calimycin。 

可利霉素为基因工程菌发酵产物，其化学结构是以4”-异戊酰螺旋霉素为主成分，包括4”-异戊酰螺旋霉素I、II、III，其次还含有约6种4”-位羟基酰基化的螺旋霉素，故其化学名统称为4”酰化螺旋霉素。 

可利霉素主成分的化学结构如式(1)所示： 

其中：R＝H，COCH₃、COCH₂CH₃；R′＝COCH₂CH(CH₃)₂、COCH₂CH(CH₃)₂、COCH₂CH(CH₃)₂

可利霉素为16元环大环内酯类抗生素，其作用机制是通过与细菌核糖体结合而抑制其蛋白质合成。 

体外试验结果表明，可利霉素对革兰阳性菌、尤其对某些耐药菌(如耐β- 内酰胺金葡菌、耐红霉素金葡菌等)有效，与同类药无明显的交叉耐药性。同时它对支原体、衣原体有很好的抗菌活性，对部分革兰阴性菌也有抗菌活性，且对弓形体、军团菌等有良好抗菌活性和组织渗透性，还有潜在的免疫调节作用。其体内抗菌活性明显优于体外[专利号：ZL200310122420.9]。临床研究表明，每日服用可利霉素片剂0.2-0.4g 5-7天，可适用于治疗化脓性链球菌引起的急性细菌性咽炎、急性化脓性扁桃体炎；敏感细菌引起的细菌性鼻窦炎、急性支气管炎；肺炎链球菌、流感嗜血杆菌以及肺炎支原体所致的轻症肺炎；支原体、衣原体引起的非淋球菌性尿道炎；敏感细菌引起的皮肤软组织感染、牙周炎、中耳炎等感染性疾病。其总有效率为87.76％，可利霉素的不良反应率低。 

临床研究证明，可利霉素是一个口服安全有效的抗生素。然而，由于可利霉素本身是多组分药物，经过发酵得到的产品，在发酵过程产生的多种杂质，给组分定量测定带来一定困难。目前建立的高效液相色谱峰高计算法，能将可利霉素样品中几对难分离的物质如异戊酰螺旋霉素II与(异)丁酰螺旋霉素III、(异)丁酰螺旋霉素II与丙酰螺旋霉素III、丙酰螺旋霉素III与其前面的小组分、丙酰螺旋霉素II与乙酰螺旋霉素III的分离度，达到中国药典规定的1.5以上；而乙酰螺旋霉素III与其前面的小组分的分离度为1.2。目前建立的可利霉素片剂质控标准，系采用高效液相分析峰高计算法，测定可利霉素9个酰化螺旋霉素组分，其中异戊酰螺旋霉素(I+II+III)总含量应不低于65％；酰化螺旋霉素总含量应不低于80％。尽管按照目前的片剂生产工艺，可以得到产品组分比例可控、质量稳定可靠的可利霉素，然而，为了改进提取纯化工艺、简化质量检测过程、提高临床治疗效果，有必要研制异戊酰螺旋霉素主要单一组分的优良制剂。尤其对于临床危重病人或不宜口服用药的病人，注射给药见效迅速，更易接受。对于发酵产生的多组分抗生素，按照化学药品质控方法很难控制其质量，而且任何细小的变化，均有可能导致物质基础的变化，增加终产品质控标准的难度，引发不可预测的用药不良反应。所以通过发酵产生的多组分抗生素注射剂迄今尚不多见。 

药代动力学研究结果表明，可利霉素中具活性的有效组分主要为异戊酰螺旋霉素I、II、III。可利霉素进入体内后很快代谢为螺旋霉素，以母体药物异戊酰螺旋霉素I、II、III和活性代谢物螺旋霉素I、II、III的AUC_0-t总和计算，其口服绝 对生物利用度平均为91.6％。文献报道，螺旋霉素人体口服绝对生物利用度为30-40％[Frydman AM et al J Antimicrob Chemother.1988，22(suppl B)：93-103]。说明异戊酰螺旋霉素的结构明显改善了活性成分螺旋霉素的生物利用度。单次服药可利霉素消除较慢，T_1/2β在23-27小时之间。 

本发明人惊讶的发现，可利霉素的主要组分异戊酰螺旋霉素III具有更加优良的抗感染活性，为此本发明提供异戊酰螺旋霉素III在制备抗感染药物中的应用。